Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 6 trang
Dung lượng: 187 KB

Giới thiệu nội dung

Purification and Structural Study of the β Form of Human cAMP-Dependent Protein Kinase Inhibitor

Tác giả: Rong Jin, Linsen Dai, Jinbiao Zheng, and Chaoneng Ji

Lĩnh vực: Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và nghiên cứu cấu trúc của dạng β của chất ức chế protein kinase phụ thuộc cAMP ở người (human PKIβ). Chất ức chế này, một protein mới bền nhiệt, đã được phân lập với hiệu suất cao thông qua hệ thống biểu hiện vi khuẩn. Các thử nghiệm hoạt động PKI đã chứng minh rằng PKIβ đã tinh chế ức chế tiểu đơn vị xúc tác của protein kinase phụ thuộc cAMP. Các thí nghiệm FTIR, phổ Raman và CD cho thấy PKIβ chứa một lượng nhỏ cấu trúc α-helix và β, nhưng chủ yếu là cấu trúc cuộn ngẫu nhiên và xoắn, điều này có thể giải thích khả năng chịu nhiệt cao của nó. Nghiên cứu cũng lần đầu tiên xem xét chi tiết sự thay đổi cấu trúc của protein này khi phản ứng với nhiệt độ bằng các thí nghiệm CD, cho thấy protein bị biến tính ở nhiệt độ cao và tái gấp nếp khi nhiệt độ giảm xuống nhiệt độ phòng.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Quy trình thực nghiệm
  • Vật liệu
  • Phân lập và giải trình tự một gen mã hóa cDNA của human PKIβ
  • Xây dựng vector biểu hiện human PKIβ
  • Sản xuất recombinant human PKIβ
  • Phân lập recombinant human PKIβ
  • Đo hoạt độ PKI của human PKIβ
  • Đo MS
  • Đo FTIR
  • Đo Raman
  • Đo CD
  • Kết quả
  • Giải trình tự gen mã hóa human PKIβ
  • Đặc điểm của recombinant human PKIβ
  • Cấu trúc của human PKIβ từ FTIR, Raman và CD
  • Sự biến tính và tái gấp nếp nhiệt của human PKIβ
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo