Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 156 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu Ứng dụng Phương pháp Công nghệ Sinh học và Truyền thống trong Nhân giống, Tạo sinh khối Rễ và Trồng trọt Cây Đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge) tại Gia Lâm, Hà Nội

Tác giả: Lê Tiến Vinh

Lĩnh vực: Khoa học cây trồng

Nội dung tài liệu:

Luận án này tập trung nghiên cứu và ứng dụng các phương pháp công nghệ sinh học, đặc biệt là kỹ thuật nuôi cấy mô và chuyển gen, kết hợp với các biện pháp kỹ thuật truyền thống để nhân giống, tạo sinh khối rễ và trồng trọt cây Đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge). Nghiên cứu nhằm mục tiêu xây dựng quy trình nhân giống in vitro cho cây Đan sâm với hệ số nhân cao, chất lượng cây giống tốt, đồng thời tối ưu hóa các biện pháp kỹ thuật trồng trên đồng ruộng. Bên cạnh đó, luận án cũng đi sâu vào việc tạo các dòng rễ tơ biến gen và xác định các yếu tố môi trường ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy rễ tơ. Các phương pháp nghiên cứu bao gồm nuôi cấy mô tế bào thực vật, cảm ứng rễ tơ bằng vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes, kiểm tra gen chuyển bằng PCR, phân tích hoạt chất bằng HPLC và các thí nghiệm trồng trọt theo phương pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ.

Kết quả nghiên cứu đã xây dựng thành công quy trình nhân giống in vitro, xác định được vật liệu và điều kiện thích hợp để cảm ứng và nhân nuôi rễ tơ cây Đan sâm, đồng thời đề xuất các biện pháp kỹ thuật trồng trọt phù hợp cho cây Đan sâm tại Hà Nội, góp phần chủ động nguồn giống và dược liệu quý.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cam đoan
  • Lời cảm ơn
  • Mục lục
  • Danh mục các từ viết tắt
  • Danh mục các bảng
  • Danh mục các hình
  • Trích yếu luận án tiến sĩ
  • Thesis abstract
  • PHẦN 1 MỞ ĐẦU
    • 1.1. Đặt vấn đề
    • 1.2. Mục tiêu
      • 1.2.1. Mục tiêu chung
      • 1.2.2. Mục tiêu cụ thể
    • 1.3. Những đóng góp mới của luận án
    • 1.4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
      • 1.4.1. Ý nghĩa khoa học
      • 1.4.2. Ý nghĩa thực tiễn
  • PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
    • 2.1. Giới thiệu về cây Đan sâm
      • 2.1.1. Nguồn gốc
      • 2.1.2. Đặc điểm thực vật học
      • 2.1.3. Phân bố
      • 2.1.4. Yêu cầu điều kiện sinh thái của cây Đan sâm
      • 2.1.5. Giá trị dược liệu
    • 2.2. Tình hình sản xuất và tiêu thụ dược liệu Đan sâm
      • 2.2.1. Trên thế giới
      • 2.2.2. Tại Việt Nam
    • 2.3. Cơ sở xác định các biện pháp kỹ thuật trồng
      • 2.3.1. Cơ sở xác định thời vụ, mật độ và phân bón cho cây trồng
      • 2.3.2. Phương pháp nhân giống cây Đan sâm
      • 2.3.3. Mật độ trồng
      • 2.3.4. Phân bón
    • 2.4. Kỹ thuật nhân giống in vitro
      • 2.4.1. Khái niệm và cơ sở của khoa học của phương pháp nhân giống in vitro
      • 2.4.2. Tổng quan tài liệu về nghiên cứu nhân giống in vitro
      • 2.4.3. Ứng dụng công nghệ nhân giống in vitro trên cây Đan sâm
    • 2.5. Tạo và nhân nuôi sinh khối rễ tơ thu nhận hợp chất thứ cấp
      • 2.5.1. Cơ chế tạo rễ tơ
      • 2.5.2. Các yếu tố ảnh hưởng tới khả năng cảm ứng tạo rễ tơ nhờ vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes
      • 2.5.3. Các yếu tố ảnh hưởng tới sự tăng sinh khối và khả năng tổng hợp hoạt chất thứ cấp của rễ tơ
      • 2.5.3. Các nghiên cứu tạo và nhân nuôi sinh khối rễ tơ thu nhận hợp chất thứ cấp ở cây Đan sâm
      • 2.5.4. Những nghiên cứu về cây Đan sâm ở Việt Nam
  • PHẦN 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
    • 3.1. Vật liệu nghiên cứu
    • 3.2. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
      • 3.2.1. Địa điểm nghiên cứu
      • 3.2.2. Thời gian nghiên cứu
    • 3.3. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
      • 3.3.1. Nội dung nghiên cứu
      • 3.3.2. Phương pháp nghiên cứu
  • PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
    • 4.1 Xây dựng quy trình nhân nhanh in vitro cây Đan sâm
      • 4.1.1. Tạo vật liệu khởi đầu
      • 4.1.2. Nhân nhanh chồi
      • 4.1.3. Tạo cây hoàn chỉnh
      • 4.1.4. Thích nghi cây ngoài vườn ươm
      • 4.1.5. Quy trình nhân giống in vitro cây Đan sâm
    • 4.2 Tạo dòng rễ tơ và nhân nuôi sinh khối rễ tơ in vitro cây Đan sâm
      • 4.2.1 Ảnh hưởng của vật liệu lây nhiễm đến khả năng tạo rễ tơ cây Đan sâm
      • 4.2.2 Ảnh hưởng của mật độ vi khuẩn A.rhizogenes đến khả năng tạo rễ tơ từ mô lá Đan sâm
      • 4.2.3 Xác định dòng rễ tơ chuyển gen bằng phương pháp PCR
      • 4.2.4 Ảnh hưởng của thành môi phần môi trường đến sinh khối rễ tơ Đan sâm dòng A5.14
      • 4.2.5 Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sinh khối rễ tơ Đan sâm dòng A5.14
      • 4.2.6 Ảnh hưởng của loại bình nuôi cấy đến sinh khối rễ tơ Đan sâm dòng A5.14
      • 4.2.7 Ảnh hưởng của điều kiện chiếu sáng đến sự tăng trưởng và sự tích lũy hoạt chất mục tiêu của dòng rễ tơ Đan sâm A5.14
      • 4.2.8 Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy đến tốc độ tăng sinh khối rễ tơ Đan sâm
      • 4.2.9 Ảnh hưởng của một số chất điều tiết sinh trưởng đến sự tăng trưởng và sự tích lũy hoạt chất mục tiêu của rễ tơ Đan sâm dòng A5.14
      • 4.2.10 Ảnh hưởng của một số yếu tố elicitor đến sự tổng hợp hoạt chất mục tiêu của rễ tơ Đan sâm dòng A5.14
      • 4.2.11 Quy trình cảm ứng và nhân nuôi rễ tơ cây Đan sâm
    • 4.3 Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật trồng cây Đan sâm từ cây giống in vitro
      • 4.3.1 Ảnh hưởng của thời vụ đến sinh trưởng, phát triển và năng suất, chất lượng dược liệu cây Đan sâm
      • 4.3.2 Ảnh hưởng của mật độ trồng đến sinh trưởng, phát triển và chất lượng dược liệu Đan sâm
      • 4.3.3 Ảnh hưởng của phân bón đến sinh trưởng, phát triển và chất lượng dược liệu Đan sâm
  • PHẦN 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
    • 5.1 Kết luận
    • 5.2 Đề nghị
  • Danh mục các công trình đã công bố liên quan đến luận án
  • Tài liệu tham khảo
  • Phụ lục