Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 182 KB

Giới thiệu nội dung

Structural Evidence for a Constant C11 Ring Stoichiometry

Tác giả: Thomas Meier, Jinshu Yu, Thomas Raschle, Fabienne Henzen, Peter Dimroth, Daniel J. Muller

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này cung cấp bằng chứng cấu trúc cho thấy các vòng c trong enzyme F-ATP synthase của Ilyobacter tartaricus và Propionigenium modestum có tỷ lệ cân bằng không đổi là 11. Các nhà khoa học đã tái tổ hợp các vòng c này trong màng lipid và sử dụng kính hiển vi lực nguyên tử (AFM) để quan sát cấu trúc. Kết quả cho thấy các vòng c này có đường kính giống nhau và tỷ lệ cân bằng là 11, bất kể chúng được sắp xếp thành các cấu trúc tinh thể hay dày đặc. Điều này cho thấy rằng các đặc điểm nội tại của tiểu đơn vị c quyết định số lượng tiểu đơn vị được đóng gói trong vòng, và tỷ lệ cân bằng này dường như không bị ảnh hưởng bởi mức độ biểu hiện của tiểu đơn vị c trong vi khuẩn.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results and Discussion
  • Synthesis and assembly of subunit c from I. tartaricus in E. coli
  • Investigation of the aggregation status of c ring preparations by Blue Native PAGE
  • Composition of the SDS-resistant c₁₁ aggregates
  • AFM of c subunit preparations
  • Conclusion
  • Experimental procedures
  • Materials
  • Construction of plasmid pt7clT
  • Synthesis and purification of c oligomers from strain BL21(DE3) transformed with various plasmids
  • Reconstitution of densely packed and 2D crystalline c ring samples
  • Purification of pure c11 without supercomplexes and attached monomers
  • Phospholipase A2, phospholipase C and lipase digestions
  • Blue Native PAGE
  • Atomic force microscopy
  • AFM data analysis and image processing
  • Other methods
  • Acknowledgements
  • References