Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 453 KB

Giới thiệu nội dung

Monitoring Ligand-Mediated Nuclear Receptor-Coregulator Interactions by Noncovalent Mass Spectrometry

Tác giả: Sarah Sanglier, William Bourguet, Pierre Germain, Virginie Chavant, Dino Moras, Hinrich Gronemeyer, Noelle Potier, Alain Van Dorsselaer

Lĩnh vực: Sắc ký khối phổ điện ly hóa phun sương không biến tính (Nondenaturing Electrospray Ionization Mass Spectrometry – ESI-MS), Nghiên cứu tương tác giữa thụ thể hạt nhân và các yếu tố đồng điều hòa.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày việc sử dụng kỹ thuật sắc ký khối phổ điện ly hóa phun sương không biến tính (ESI-MS) để xác định đặc điểm của việc peptide chứa hộp corepressor (CoRNR box) gắn kết với miền gắn kết ligand (LBD) của heterodimer thụ thể RAR-RXR. Nghiên cứu đã theo dõi độ bền của các phức hợp ba ngôi RARα-RXRα-CoRNR dưới sự hiện diện của các loại chất chủ vận hoặc đối kháng khác nhau đối với hai thụ thể, bao gồm cả các chất đối kháng ngược. Kết quả cho thấy sự khác biệt rõ rệt trong tác động của các retinoid khác nhau lên việc gắn kết corepressor. Kỹ thuật ESI-MS được chứng minh là một phương pháp mạnh mẽ, bổ sung cho các phương pháp cổ điển, cho phép: (a) cung cấp bằng chứng trực tiếp về sự hình thành các phức hợp thụ thể hạt nhân không biến tính, (b) xác định tỷ lệ gắn kết ligand và (c) theo dõi tác động của ligand lên các phức hợp này.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Tối ưu hóa điều kiện hoạt động của ESI-MS để phát hiện phức hợp heterodimer-ligand-corepressor
  • Phân tích phổ khối ESI của phức hợp HD-BMS493-CoRNR1 ở các điện áp gia tốc khác nhau (Vc)
  • Phân tích phổ khối ESI của phức hợp HD-CoRNR2 ở các điện áp gia tốc khác nhau (Vc)
  • Tác động của ligand lên độ bền của phức hợp ba ngôi HD-CoRNR1
  • Tác động của ligand lên độ bền của phức hợp ba ngôi HD-CoRNR2
  • Hoạt tính đối kháng của retinoid tổng hợp đối với RARα
  • Tương tác tăng cường giữa RARα và NCoR được gây ra bởi các retinoid tổng hợp
  • Mối quan hệ giữa loại tương tác tham gia vào sự hình thành phức hợp HD-ligand-CoRNR và độ bền pha khí của chúng
  • Kết luận