Identification Of The Amniotic Fluid Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-1 Phosphorylation Sites And Propensity To Proteolysis Of The Isoforms

Identification of the amniotic fluid insulin-like growth
factor binding protein-1 phosphorylation sites and
propensity to proteolysis of the isoforms

Tác giả: Lorenzo Dolcini, Alberto Sala, Monica Campagnoli, Sara Labò, Maurizia Valli, Livia Visai, Lorenzo Minchiotti, Hugo L. Monaco, and Monica Galliano

Lĩnh vực: Biochemistry

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định các vị trí phosphoryl hóa trên các dạng khác nhau của protein liên kết yếu tố tăng trưởng giống insulin-1 (IGFBP-1) trong dịch ối của con người và ảnh hưởng của các biến đổi này đến khả năng bị phân giải bởi protease. Các nhà nghiên cứu đã phân lập và tinh sạch các dạng IGFBP-1 không phosphoryl hóa và năm dạng được phosphoryl hóa khác nhau từ dịch ối. Thông qua phân tích phổ khối lượng và sắc ký lỏng-khối phổ song song, họ đã xác định được năm vị trí serine được phosphoryl hóa (Ser95, Ser98, Ser101, Ser119, và Ser169). Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng mức độ và vị trí của các nhóm phosphate ảnh hưởng đến khả năng phân giải protein của một protease trong dịch ối, với các dạng được phosphoryl hóa nhiều hơn có xu hướng dễ bị phân giải hơn.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Purification of IGFBP-1 isoforms
• Mass determination of the IGFBP-1 isoforms
• Identification of IGFBP-1 phosphorylation sites
• Chromatographic separation of the V8 peptides
• Proteolysis
• Discussion
• Experimental procedures
• References