Minor Capsid Proteins Of Mouse Polyomavirus Are Inducers Of Apoptosis When Produced Individually But Are Only Moderate Contributors To Cell Death During The Late Phase Of Viral Infection

Minor capsid proteins of mouse polyomavirus are inducers of apoptosis when produced individually but are only moderate contributors to cell death during the late phase of viral infection

Tác giả: Sandra Huerfano, Vojtěch Žíla, Evžen Bouřa, Hana Španielová, Jitka Štokrová, and Jitka Forstová

Lĩnh vực: Department of Genetics and Microbiology, Faculty of Science, Charles University, Prague, Czech Republic

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xem xét vai trò của các protein cấu trúc nhỏ của virus polyoma ở chuột (MPyV), cụ thể là VP2 và VP3, trong việc gây ra quá trình chết theo chương trình (apoptosis) khi chúng được biểu hiện riêng lẻ và trong giai đoạn muộn của quá trình nhiễm virus. Các protein nhỏ liên kết với EGFP (VP2-EGFP và VP3-EGFP) cho thấy khả năng tiêu diệt tế bào nhanh chóng khi biểu hiện riêng lẻ, cũng như hoạt động như những tác nhân gây apoptosis mạnh mẽ, phụ thuộc vào sự kích hoạt caspase. Các protein này cũng được phát hiện liên kết với màng của mạng lưới nội chất và vỏ nhân. Tuy nhiên, trong quá trình nhiễm virus, các protein nhỏ này chỉ đóng góp một cách vừa phải vào quá trình apoptosis và không thiết yếu cho sự phá hủy tế bào vào cuối chu kỳ nhân đôi của virus.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Correspondence
• Minor capsid proteins of mouse polyomavirus (MPyV) are essential for virus infection.
• Structured digital abstract
• Abbreviations
• Results
• Individual expression of the minor capsid proteins (VP2 or VP3)
• Both VP2 and VP3 induce fast cell death
• Intracellular localization of the wt minor proteins and their fusion variants
• Both VP2 and VP3 are potent inducers of apoptosis
• Cell death induced by VP2 and VP3 is dependent on the activation of caspases
• VP2 and VP3 contribute to apoptosis induced during MPyV infection
• Discussion
• Experimental procedures
• Cell lines and transfections
• Cell infection
• DNA constructs
• Western blot analysis
• Immunofluorescent staining and live imaging
• Antibodies
• Evaluation of cytotoxicity
• Flow cytometry analysis
• Quantification of caspase 3 activity and the caspase inhibition assay
• Electron microscopy
• Immuno-electron microscopy
• Acknowledgements
• References
• Supporting information