Báo cáo khoa học: Hexadecylphosphocholine interferes with the intracellular transport of cholesterol in HepG2 cells

Hexadecylphosphocholine Interferes With the Intracellular Transport of Cholesterol in HepG2 Cells

Tác giả: María P. Carrasco, José M. Jiménez-López, Josefa L. Segovia, and Carmen Marco

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế phân tử mà qua đó hexadecylphosphocholine (HePC) gây rối loạn cân bằng nội môi cholesterol trong tế bào HepG2. Các thí nghiệm sử dụng chất nền được đánh dấu phóng xạ cho thấy HePC ảnh hưởng đến quá trình tổng hợp cholesterol, số phận của cholesterol từ lipoprotein mật độ thấp (LDL) và sự vận chuyển cholesterol giữa màng sinh chất và lưới nội chất. Kết quả cho thấy HePC làm tăng quá trình tổng hợp cholesterol khi sử dụng acetate làm chất nền, đồng thời làm tăng hoạt động và biểu hiện gen của HMG-CoA reductase và thụ thể LDL. Tuy nhiên, HePC lại làm giảm quá trình ester hóa cholesterol và cản trở sự vận chuyển cholesterol từ màng sinh chất đến lưới nội chất. Sự gián đoạn này dẫn đến sự cạn kiệt cholesterol trong lưới nội chất và mất cân bằng tỷ lệ phosphatidylcholine/cholesterol, có khả năng giải thích hoạt tính chống tăng sinh của HePC.

Mục lục chi tiết:

• Hexadecylphosphocholine Interferes with the Intracellular Transport of Cholesterol in HepG2 Cells
• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Treatment with HePC increased the biosynthesis of cholesterol in HepG2 cells
• Treatment with HePC induced de novo cholesterol synthesis from acetate but not from mevalonate in HepG2 cells
• Simultaneous exposure to HePC and pravastatin but not in cells incubated with only HePC
• Treatment with HePC increased HMG-CoA reductase activity in HepG2 cells
• Effect of HePC on the biosynthesis of cholesteryl esters and triacylglycerols in HepG2 cells
• Effect of HePC on protein levels and gene expression in HepG2 cells
• Effect of HePC on mRNA expression of HMG-CoA reductase and LDLr
• Effect of HePC on the destiny of cholesteryl linoleate in LDL in HepG2 cells
• Effect of HePC on the transport of cholesterol from the plasma membrane to the endoplasmic reticulum
• Discussion
• Experimental procedures
• Chemicals and reagents
• Cell culture and treatments
• Cholesterol and CE synthesis
• Lipid extraction and analysis
• Cell uptake, hydrolysis and re-esterification of [1α,2α(n)-3H]cholesteryl linoleate in LDL
• Transport of cholesterol from the plasma membrane to the endoplasmic reticulum
• Measurement of HMG-CoA reductase activity
• Immunoblot analysis of HMG-CoA reductase and ACAT expression
• Reverse transcription and real-time PCR quantification of RNA
• Statistics
• Other analyses
• Acknowledgements
• References