Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 239 KB

Giới thiệu nội dung

Functionally Different Pools of Shiga Toxin Receptor, Globotriaosyl Ceramide, in HeLa Cells

Tác giả: Thomas Falguières, Winfried Römer, Mohamed Amessou, Carlos Afonso, Claude Wolf, Jean-Claude Tabet, Christophe Lamaze, Ludger Johannes

Lĩnh vực: Sinh học tế bào, Độc tố học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào động học và vai trò của globotriaosyl ceramide (Gb3), thụ thể của Shiga toxin, trong tế bào HeLa. Kết quả cho thấy Gb3 không chỉ cần thiết cho việc Shiga toxin gắn kết vào tế bào mà còn cho quá trình vận chuyển nội bào của độc tố này. Độc tố Shiga thúc đẩy sự tập trung Gb3 vào các màng kháng dung môi (DRM) và quá trình nhập bào. Sau đó, lượng Gb3 tại màng plasma được bổ sung từ các kho dự trữ nội bào. Mặc dù quá trình nhập bào không bị ảnh hưởng trong điều kiện phục hồi, nhưng quá trình vận chuyển ngược của Shiga toxin đến bộ máy Golgi và lưới nội chất bị ức chế đáng kể. Sự ức chế này có tính đặc hiệu, không ảnh hưởng đến quá trình vận chuyển của cholera toxin hoặc quá trình sinh tổng hợp protein. Các phát hiện này cho thấy sự tồn tại của các dạng Gb3 khác nhau tại màng plasma, có thể là các yếu tố quyết định đến hiệu quả của quá trình vận chuyển ngược, đặc biệt là thành phần các loài phân tử của Gb3.

Mục lục chi tiết:

  • Gb3 dynamics in HeLa cells
  • Gb3 is required for retrograde transport of Shiga toxin from endosomes to the TGN
  • Shiga toxin recruits Gb3 to DRMs
  • Plasma membrane dynamics of Gb3
  • Cell biological analysis of the recovery condition
  • Analysis of the molecular species compositions of Gb3 pools
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Cells and reagents
  • Immunofluorescence analysis on PPMP-treated cells
  • Glycolipid extraction and analysis by TLC
  • Plasma membrane enrichment and characterization
  • Biochemical analysis of STxB retrograde transport, association with DRMs, degradation and recycling
  • Biochemical analysis of CTxB transport and association with DRMs
  • Measurement of protein biosynthesis
  • STxB and Tf internalization assays
  • Analysis of Gb3 molecular species