Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 150 KB

Giới thiệu nội dung

Functional Characterization and Me2+ Ion Specificity of a Ca2+-Citrate Transporter from Enterococcus faecalis

Tác giả: Victor S. Blancato, Christian Magni, Juke S. Lolkema

Lĩnh vực: Vi sinh vật học phân tử, Khoa học và Công nghệ Sinh học Phân tử Groningen, Đại học Groningen, Hà Lan; Viện Sinh học Phân tử và Tế bào Rosario (IBR-CONICET), Khoa Khoa học Sinh hóa và Dược, Đại học Quốc gia Rosario, Argentina.

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích chức năng và đặc tính riêng biệt đối với ion kim loại hóa trị hai của một chất vận chuyển citrate từ vi khuẩn Enterococcus faecalis, được đặt tên là EfCitH. Chất vận chuyển này thuộc họ CitMHS, có vai trò quan trọng trong quá trình lên men citrate. Các thí nghiệm đã được thực hiện trên màng tế bào vi khuẩn Escherichia coli được biểu hiện gen EfCitH. Kết quả cho thấy EfCitH có khả năng vận chuyển phức hợp canxi-citrate (Ca2+-citrate) với ái lực cao. Đặc tính nhận biết ion kim loại của EfCitH tương tự với chất vận chuyển citrate của Bacillus subtilis, có khả năng vận chuyển citrate kết hợp với các ion như Ca2+, Sr2+, Mn2+, Cd2+ và Pb2+, nhưng không vận chuyển các ion Mg2+, Zn2+, Ni2+ và Co2+. Điều này cho thấy sự tương quan giữa kích thước ion kim loại và khả năng vận chuyển của chất vận chuyển này. Nghiên cứu cũng đề cập đến sự khó khăn trong việc biểu hiện dị thể của gen EfCitH và các gen tương tự từ các loài vi khuẩn khác, có thể do độc tính của protein đối với tế bào chủ.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Thảo luận
  • Thủ tục thực nghiệm
  • Các chủng vi khuẩn, điều kiện nuôi cấy và tạo dòng EfCitH
  • Chuẩn bị màng túi RSO
  • SDS/PAGE và miễn dịch Western
  • Các xét nghiệm vận chuyển trong tế bào hoàn chỉnh
  • Các xét nghiệm vận chuyển trong màng RSO
  • Vận chuyển do PMF
  • Đo lường ái lực
  • Trao đổi đồng nhất và thoát ra
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo