Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 176 KB

Giới thiệu nội dung

Effect Of Oculopharyngeal Muscular Dystrophy-Associated Extension Of Seven Alanines On The Fibrillation Properties Of The N-Terminal Domain Of PABPN1

Tác giả: Grit Lodderstedt, Simone Hess, Gerd Hause, Till Scheuermann, Thomas Scheibel, Elisabeth Schwarz

Lĩnh vực: Biotechnologie, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát ảnh hưởng của việc kéo dài chuỗi bảy alanine lên đặc tính tạo sợi của miền N-terminal của protein PABPN1. Bệnh teo cơ hầu họng (OPMD) là một bệnh di truyền trội liên quan đến sự mở rộng trinucleotide trong gen PABPN1, dẫn đến sự kéo dài chuỗi alanine. Nghiên cứu so sánh các đặc tính tạo sợi, hình thái sợi và độ bền của sợi giữa protein dạng hoang dã (N-WT) và biến thể có bảy alanine bổ sung (N-(+7)Ala). Kết quả cho thấy sự khác biệt rõ rệt về động học tạo sợi, khả năng tạo mầm và đặc điểm cấu trúc của sợi giữa hai biến thể, cho thấy sự kéo dài chuỗi alanine ảnh hưởng đáng kể đến quá trình hình thành sợi.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Oculopharyngeal muscular dystrophy (OPMD)
  • Protein folding to a conformation distinct from the native fold gives rise to a wide range of diseases.
  • Huntington’s disease is one of the most prominent examples of neurodegenerative diseases that are caused by trinucleotide expansions of CAG repeats and thus an expansion of a run of glutamine residues [3].
  • Poly L-alanine length dependent fibril properties
  • Results
  • Seeding of fibril growth of PABPN1 N-terminal fragment variants
  • Fibrillation kinetics were first followed via fluorescence measurements with thioflavine T (ThT)
  • Fibril formation kinetics of N-(+7)Ala
  • Fibril formation kinetics of N-WT
  • Fibrils of N-WT and N-(+7)Ala differ in morphology and stability
  • Analysis of AFM images to determine substructure widths.
  • Stability of fibrils against solubilization with guanidinium thiocyanate.
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Recombinant protein production and purification
  • Fibril formation and fibril analysis by ANS fluorescence
  • Seed preparation
  • Quantification of soluble (monomeric) protein during fibril formation by RP-HPLC
  • EM and AFM
  • Chemical stability of fibrils
  • Acknowledgements
  • References