Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 151 KB

Giới thiệu nội dung

Engineering and characterization of human manganese superoxide dismutase mutants with high activity and low product inhibition

Tác giả: Karuppiah Chockalingam, James Luba, Harry S. Nick, David N. Silverman, Huimin Zhao

Lĩnh vực: Kỹ thuật hóa học, kỹ thuật sinh hóa học, hóa học, y sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc kỹ thuật hóa enzyme manganese superoxide dismutase (hMnSOD) của con người nhằm cải thiện hoạt tính xúc tác và giảm thiểu sự ức chế sản phẩm. Sử dụng phương pháp tiến hóa định hướng và hệ thống chọn lọc dựa trên khả năng sống sót của E. coli trong môi trường có paraquat, hai đột biến mới, C140S và N73S, đã được xác định. Các đột biến này, khi kết hợp với đột biến Q143A ban đầu, đã cho thấy hoạt tính xúc tác được cải thiện đáng kể và duy trì mức độ ức chế sản phẩm thấp. Nghiên cứu cũng cung cấp những hiểu biết mới về mối quan hệ cấu trúc-chức năng của hMnSOD, mở ra tiềm năng ứng dụng trong y sinh, đặc biệt là liệu pháp ung thư.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Thiết lập hệ thống chọn lọc
  • Sàng lọc thư viện
  • Phân tích động học
  • Xử lý các đột biến N73S-Q143A hMnSOD và N73S-C140S-Q143A hMnSOD
  • Thảo luận
  • Kết luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Hóa chất và bộ dụng cụ
  • Plasmid, chủng và subcloning
  • Môi trường nuôi cấy
  • PCR lỗi và DNA shuffling
  • Chuẩn bị enzyme
  • Xúc tác