Báo cáo khoa học: Constitutive expression of the human peroxiredoxin V gene contributes to protection of the genome from oxidative DNA lesions and to suppression of transcription of noncoding DNA

Constitutive expression of the human peroxiredoxin V gene contributes to protection of the genome from oxidative DNA lesions and to suppression of transcription of noncoding DNA

Tác giả: Andrey Kropotov, Vladimir Serikov, Jung Suh, Alexandra Smirnova, Vladimir Bashkirov, Boris Zhivotovsky, Nikolai Tomilin

Lĩnh vực: Nghiên cứu về các protein peroxiredoxin, đặc biệt là peroxiredoxin V (PRDX5), vai trò của chúng trong việc bảo vệ bộ gen khỏi tổn thương DNA do oxy hóa và trong việc ức chế sao chép DNA phi mã.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của gen peroxiredoxin V (PRDX5) ở người trong việc bảo vệ bộ gen khỏi các tổn thương DNA do stress oxy hóa và trong việc điều hòa sao chép DNA phi mã. Các thí nghiệm cho thấy biểu hiện của gen PRDX5 không bị kích thích bởi tác nhân oxy hóa menadione. Việc làm giảm biểu hiện gen PRDX5 dẫn đến sự gia tăng đáng kể 8-oxoguanine trong DNA tế bào, cho thấy PRDX5 đóng góp vào việc bảo vệ bộ gen khỏi các tổn thương oxy hóa tự phát. Ngoài ra, việc giảm biểu hiện PRDX5 còn làm tăng biểu hiện các bản ghi của các chuỗi DNA vệ tinh alpha và vệ tinh III, gợi ý rằng PRDX5 có thể cần thiết cho việc ức chế sao chép dị nhiễm sắc thể.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Vai trò của PRDX5 trong việc ức chế oxy hóa DNA (sự hình thành 8-oxoG)
• Sao chép DNA vệ tinh trong dòng tế bào PRDX5 bị biến đổi
• Thảo luận
• Thủ tục thực nghiệm
• Nuôi cấy tế bào
• Xây dựng các plasmid siRNA
• Phân lập các dòng tế bào A549 đã giảm biểu hiện PRDX5 và các dòng tế bào đối chứng
• Biểu hiện của PRDX5 trong E. coli
• Phân tích 8-oxoG trong DNA
• Miễn dịch blotting
• Chuyển nhiễm các tế bào A549 bằng siRNA NRF2
• Trích xuất RNA, tổng hợp cDNA và PCR thời gian thực
• Các phương pháp tính toán
• Lời cảm ơn
• Tài liệu tham khảo