Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 208 KB

Giới thiệu nội dung

Cloning of a rat gene encoding the histo-blood group A enzyme

Tên đề tài: Cloning of a rat gene encoding the histo-blood group A enzyme

Tác giả: Anne Cailleau-Thomas, Béatrice Le Moullac-Vaidye, Jézabel Rocher, Danièle Bouhours, Claude Szpirer and Jacques Le Pendu

Lĩnh vực: Biochemistry, Genetics

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này báo cáo việc phân lập một gen BDIX chuột đồng dạng với gen ABO ở người, mã hóa cho enzyme nhóm máu A. Chuột đồng BDIX đã được xác định trình tự mã hóa hoàn chỉnh của một gen giống với gen ABO ở người. Việc xác định các ranh giới exon-intron, thông qua so sánh trình tự mã hóa với các trình tự gen chuột đồng từ các ngân hàng dữ liệu, cho thấy cấu trúc gen chuột đồng giống hệt cấu trúc gen ABO ở người. Chuột đồng BDIX có sự tương đồng về gen với nhiễm sắc thể số 3 (q11-q12), một vùng tương đồng với vùng 9q34 ở người. Phân tích phát sinh loài của một tập hợp các trình tự có sẵn cho các thành viên khác nhau của cùng một họ gen đã xác nhận rằng trình tự chuột đồng thuộc về cụm gen ABO. CDNA đã được chuyển trong các tế bào CHO đã được chuyển ổn định với enzyme α1,2-fucosyltransferase để biểu hiện các chất nhận H oligosaccharide. Phân tích các tế bào chuyển gen bằng phương pháp tế bào học huỳnh quang cho thấy sự tổng hợp các epitope A nhưng không phải B. Phân tích trực tiếp hoạt tính enzyme sử dụng 2′-fucosylactose làm chất nhận đã xác nhận hoạt tính UDP-GalNAc: Fuca1,2GalaGalNAc transferase (transferase A) mạnh mẽ của sản phẩm enzyme và cho phép phát hiện hoạt tính UDP-Gal: Fuca1,2Gal Gal transferase (transferase B) nhỏ. Sự hiện diện của mRNA và các kháng nguyên A và B đã được tìm kiếm trong các mô khác nhau của chuột đồng BDIX. Có sự phù hợp chung giữa sự hiện diện của mRNA và kháng nguyên A. Sự phân bố mô của kháng nguyên A và B ở chủng chuột đồng BDIX đồng hợp tử khác biệt đáng kể, cho thấy rằng các kháng nguyên này không thể được tổng hợp bởi các alen của cùng một gen trong chủng chuột đồng này.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và Phương pháp
    • Phân lập gen ABO-like ở chuột
    • Phân tích trình tự
    • Định vị nhiễm sắc thể
    • Phân tích RT-PCR
    • Chuyển gen tế bào CHO
    • Phân tích tế bào học huỳnh quang
    • Phát hiện hoạt tính enzyme
    • Phân tích hóa mô miễn dịch
  • Kết quả
    • Phân tích trình tự
    • Cấu trúc gen ABO ở chuột
    • Định vị nhiễm sắc thể gen Abo ở chuột
    • Xác định hoạt tính enzyme
  • Biểu hiện mô của mRNA và kháng nguyên A và B ở chuột
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo