Characterization Of Monomeric Substates Of Ascorbate Oxidase

Characterization of monomeric substates of ascorbate oxidase

Tác giả: Almerinda Di Venere, Eleonora Nicolai, Nicola Rosato, Antonello Rossi, Alessandro Finazzi Agrò, Giampiero Mei

Lĩnh vực: Biochemistry, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc làm sáng tỏ các trạng thái trung gian của enzyme ascorbate oxidase (AAO) trong quá trình gấp khúc/mở cuộn. Sử dụng phổ huỳnh quang tương quan (FCS), các nhà nghiên cứu đã chứng minh sự hình thành các đơn phân tử bị gấp khúc một phần do sự phân ly hoàn toàn của các đơn vị phụ thuộc vào pH. Điều này cho phép nghiên cứu sâu hơn về cấu trúc của các đơn phân tử AAO thông qua phổ huỳnh quang và phổ CD. Kết quả cho thấy các đơn phân tử vẫn giữ nguyên cấu trúc bậc hai nhưng có những thay đổi tinh tế trong cấu trúc bậc ba. Nghiên cứu cũng khám phá sự mở cuộn của protein dưới áp suất thủy tĩnh cao ở các giá trị pH khác nhau, quan sát thấy sự phụ thuộc rõ rệt vào nồng độ protein ở pH 8, trong khi ở pH 10 và 6, enzyme tồn tại ở dạng đơn phân tử hoặc lưỡng phân tử tương ứng. Những phát hiện này cho thấy các trạng thái đơn phân tử bị gấp khúc một phần có thể tồn tại trong cảnh quan năng lượng của AAO và độ ổn định tổng thể của AAO bị chi phối mạnh mẽ bởi một vài tương tác tứ cấp tại giao diện giữa các đơn vị phụ.

Mục lục chi tiết: