Báo cáo khoa học: Caveolin-1 influences P2X7 receptor expression and localization in mouse lung alveolar epithelial cells

Tác giả: K. Barth, K. Weinhold, A. Guenther, M. T. Young, H. Schnittler and M. Kasper

Lĩnh vực: Giải phẫu học, Khoa học Y sinh, Sinh học Tế bào

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối quan hệ giữa Caveolin-1 và thụ thể P2X7 trong tế bào biểu mô phổi của chuột. Kết quả cho thấy Caveolin-1 ảnh hưởng đến biểu hiện và vị trí của thụ thể P2X7. Thụ thể P2X7 được tìm thấy trong các màng lipid của tế bào biểu mô phổi, và sự hiện diện của Caveolin-1 dường như là cần thiết cho biểu hiện đầy đủ của thụ thể P2X7. Sự giảm biểu hiện Caveolin-1, cả ở chuột knockout và thông qua can thiệp RNAi, dẫn đến giảm đáng kể mức độ biểu hiện của thụ thể P2X7. Nghiên cứu này cung cấp bằng chứng về sự tương tác tiềm năng giữa thụ thể P2X7 và Caveolin-1 trong màng lipid, mở đường cho các nghiên cứu chức năng và sinh hóa sâu hơn về ý nghĩa sinh lý của mối liên hệ này.

Mục lục chi tiết:

• Caveolin-1 influences P2X7 receptor expression and localization in mouse lung alveolar epithelial cells
• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Presence of the P2X7 receptor and its modification in alveolar epithelial cell lines
• Isolation of lipid rafts and localization of Caveolin-1 and P2X7
• Immunogold labeling electron microscopy of P2X7 in alveolar epithelial E10 cells
• Double-label immunofluorescence of Caveolin-1 and P2X7 in alveolar epithelial E10 cells
• Caveolin-1-knockout animals show reduced P2X7 expression levels
• shRNA-mediated downregulation and altered localization of Caveolin-1 in E10 cells
• Discussion
• Experimental procedures
• Cell lines and reagents
• Cell culture
• Triton X-100 solubility
• Western blot analysis
• Immunoprecipitation
• Preparation of detergent-insoluble membrane fractions
• Preparation of low-density membrane fractions under detergent-free conditions
• Deglycosylation
• Cryoimmunogold electron microscopy
• shRNA synthesis and transfection
• References