Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Binase Cleaves Cellular Noncoding RNAs and Affects Coding mRNAs

Binase Cleaves Cellular Noncoding RNAs and Affects Coding mRNAs

Tác giả: Vladimir A. Mitkevich, Nickolai A. Tchurikov, Pavel V. Zelenikhin, Irina Yu. Petrushanko, Alexander A. Makarov, Olga N. Ilinskaya

Lĩnh vực: Apoptosis; cellular RNA degradation; cytotoxicity; gene expression; RNase

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này khám phá tác động của binase, một enzyme ribonuclease có độc tính cao từ Bacillus intermedius, đối với RNA nội bào và biểu hiện của mRNA tiền và phản ứng apoptosis. Binase được chứng minh là có khả năng phân cắt RNA phi mã, dẫn đến giảm tổng lượng RNA trong các tế bào nhạy cảm với độc tính của nó. Đáng chú ý, sự giảm RNA này không tương quan trực tiếp với quá trình apoptosis. Nghiên cứu cũng cho thấy binase ảnh hưởng đến biểu hiện của các gen liên quan đến apoptosis, làm giảm mức độ mRNA của gen chống apoptosis bcl-2 và tăng cường biểu hiện của các gen tiền apoptosis như p53 và hSK4. Những phát hiện này cho thấy binase đóng vai trò điều hòa các quá trình phụ thuộc RNA trong sự tăng sinh tế bào và quá trình apoptosis.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Trực quan hóa RNA tế bào
  • Xác định mức RNA, khả năng sống và apoptosis bằng phương pháp tế bào dòng chảy
  • Binase làm giảm lượng RNA trong tế bào
  • Binase tăng tốc độ thủy phân poly(I) trong tế bào
  • IL loại bỏ tác động gây apoptosis, nhưng không phải tác động làm giảm RNA của binase
  • Thủy phân mRNA hSK4 bởi RNase trong ống nghiệm
  • Binase ảnh hưởng đến số lượng mRNA tiền và phản ứng apoptosis trong cơ thể sống
  • Thảo luận
  • Sự giảm RNA do binase gây ra không tương quan với apoptosis
  • Hiệu quả của việc giảm hàm lượng RNA do binase gây ra là lớn nhất trong phân nhóm tế bào apoptosis
  • RNA phi mã là chất nền bắt buộc đối với binase
  • Các tính năng của quá trình thủy phân RNA trong ống nghiệm không cho phép phân biệt RNase độc và không độc
  • Binase ảnh hưởng đến biểu hiện gen
  • Kết luận
  • Thủ tục thực nghiệm
  • Enzyme
  • Nuôi cấy tế bào
  • Trực quan hóa RNA bằng kính hiển vi huỳnh quang
  • Xác định mức RNA, khả năng sống và apoptosis bằng phương pháp tế bào dòng chảy
  • Chiết xuất các phân số bào tương và nhân của tế bào, và xác định hoạt tính RNase trong các phân số này
  • Tổng hợp RNA
  • Ủ
  • Xử lý RNase
  • Phân đoạn
  • Phân tích RT-PCR