Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 211 KB

Giới thiệu nội dung

The refolding of type II shikimate kinase from Erwinia chrysanthemi after denaturation in urea

Tác giả: Eleonora Cerasoli, Sharon M. Kelly, John R. Coggins, Deborah J. Boam, David T. Clarke, and Nicholas C. Price

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Biology

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào quá trình tái gấp của enzyme shikimate kinase (SK) loại II từ Erwinia chrysanthemi sau khi bị biến tính bởi urea. Các phương pháp phổ học như CD và huỳnh quang được sử dụng để theo dõi sự thay đổi cấu trúc bậc hai và bậc ba. Kết quả cho thấy enzyme bị biến tính hoàn toàn trong 4 M urea và có thể phục hồi khoảng 95% hoạt tính khi loại bỏ urea. Quá trình tái gấp diễn ra qua ít nhất bốn giai đoạn động học, với giai đoạn chậm nhất tương ứng với sự phục hồi khả năng liên kết shikimate và hoạt tính enzyme. Một giai đoạn sớm được ghi nhận liên quan đến sự hình thành cấu trúc trung gian bị gấp lại với cấu trúc bậc hai chưa hoàn chỉnh. Nghiên cứu cũng thảo luận về ý nghĩa của những phát hiện này đối với cơ chế gấp của các protein thuộc lớp α/β khác.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Thu nhận hoạt tính enzyme
  • Đo đạc phổ
  • Kết quả
  • Sự biến tính của enzyme
  • Sự thay đổi hoạt tính khi có mặt urea
  • Sự tái gấp của enzyme
  • Sự phục hồi hoạt tính
  • Sự phục hồi cấu trúc bậc hai khi tái gấp
  • Sự phục hồi cấu trúc bậc ba
  • Tái gấp có mặt shikimate
  • ANS như một đầu dò trong quá trình tái gấp
  • So sánh với các nghiên cứu về protein liên quan
  • Mô hình và đặc tính của các cấu trúc trung gian
  • Tài liệu tham khảo