Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 139 KB

Giới thiệu nội dung

BGN16.3, a novel acidic β-1,6-glucanase from mycoparasitic fungus Trichoderma harzianum CECT 2413

Tác giả: Manuel Montero, Luis Sanz, Manuel Rey, Enrique Monte, Antonio Llobell

Lĩnh vực: Sinh hóa thực vật, Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này báo cáo việc phân lập và đặc tính hóa một thành phần mới trong phức hợp đa enzym β-1,6-glucanase (EC 3.2.1.75) được tiết ra bởi nấm Trichoderma harzianum. Protein mới này, có tên là BGN16.3, là isozyme thứ ba thể hiện hoạt tính endo-β-1,6-glucanase được mô tả cho đến nay ở T. harzianum CECT 2413. BGN16.3 là một β-1,6-glucanase có tính axit, được cảm ứng đặc hiệu bởi sự hiện diện của thành tế bào nấm trong môi trường nuôi cấy T. harzianum. Protein này đã được tinh chế và đặc tính hóa về khối lượng phân tử, điểm đẳng điện, và hoạt tính enzym. Phân tích hồ sơ biểu hiện của BGN16.3 cho thấy sự kiểm soát bởi nguồn carbon đối với sự tích lũy enzym, với sự cảm ứng nhanh và mạnh mẽ bởi thành tế bào nấm, một điều kiện thường được coi là mô phỏng hiện tượng ký sinh.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Từ khóa
  • Thư tín
  • Tóm tắt
  • Nội dung tài liệu
  • Tên đề tài
  • Lĩnh vực
  • Kết quả
  • Sản xuất và tinh chế enzym
  • Các tham số vật lý hóa học
  • Các tham số động học
  • Đặc tính cơ chất và sản phẩm phản ứng
  • Trình tự protein
  • Hình 1. Isođiện tập và nhuộm hoạt tính β-1,6-glucanase cho các protein ngoại bào do T. harzianum CECT 2424 (1) và T. harzianum CECT 2413 (2) sản xuất sau 24 hoặc 48 giờ nuôi cấy trên chitin hoặc thành tế bào B. cinerea làm nguồn carbon duy nhất.
  • Bảng 1. Tinh chế β-1,6-glucanase (BGN16.3).
  • Hình 2. Tinh chế BGN16.3. Phân tích SDS/PAGE (A) và nhuộm hoạt tính bằng lớp phủ màng agar pustulan (B) của các bước tinh chế khác nhau của BGN16.3.
  • Hình 3. Phân tích HPLC về cơ chế phân hủy cơ chất bởi BGN16.3 trên pustulan.
  • Bảng 2. Đặc tính cơ chất của BGN16.3 đã tinh chế.
  • Hình 4. Hồ sơ biểu hiện của BGN16.3 dưới các điều kiện cảm ứng khác nhau.
  • Thảo luận
  • Bảng 3. Đặc tính sinh hóa của ba β-1,6-glucanase được tinh chế từ T. harzianum CECT 2413.
  • Quy trình thực nghiệm
  • Các chủng và điều kiện nuôi cấy
  • Định lượng enzym
  • Tinh chế protein
  • Điện di gel và nhuộm hoạt tính β-1,6-glucanase
  • Đặc tính cơ chất
  • Xác định sản phẩm thủy phân
  • Chuẩn bị kháng huyết thanh
  • Chuỗi peptide một phần
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo