Báo cáo khoa học: An alcohol acyl transferase from apple (cv. Royal Gala), MpAAT1, produces esters involved in apple fruit flavor

An alcohol acyl transferase from apple (cv. Royal Gala), MpAAT1, produces esters involved in apple fruit flavor

Tác giả: Edwige J. F. Souleyre, David R. Greenwood, Ellen N. Friel, Sakuntala Karunairetnam and Richard D. Newcomb

Lĩnh vực: Khoa học Nông nghiệp, Sinh hóa học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc phân lập và đặc tính hóa gen MpAAT1 từ giống táo Royal Gala. Gen này mã hóa một enzyme alcohol acyl transferase (AAT) đóng vai trò quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp các ester tạo nên hương vị đặc trưng của táo. Enzyme MpAAT1 có khả năng sử dụng nhiều loại alcohol và CoA làm cơ chất, với ái lực và tốc độ chuyển hóa khác nhau tùy thuộc vào từng loại cơ chất cụ thể. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng MpAAT1 có thể sản xuất nhiều loại ester có mặt trong quả táo Royal Gala, bao gồm cả các ester chuỗi thẳng và chuỗi nhánh. Các đặc tính động học của enzyme này, đặc biệt là sự thay đổi ái lực và tốc độ phản ứng theo nồng độ cơ chất, có thể giải thích sự đa dạng hương vị của các loại trái cây khác nhau trong quá trình chín.

Mục lục chi tiết:

• An alcohol acyl transferase from apple (cv. Royal Gala), MpAAT1, produces esters involved in apple fruit flavor
• Keywords
• Correspondence
• Abbreviations
• Apple flavor is characterized by combinations of ester compounds…
• Apples have long been cultivated by humans for their fruit…
• The final step in ester biosynthesis is catalyzed by acyl transferases…
• Results
• The MpAAT1 gene and its predicted protein
• Comparison and phylogenetics of MpAAT1
• E. coli expression of MpAAT1
• Fig. 1. MpAAT1 gene expression in apple tissues.
• Fig. 2. Amino acid sequence alignment of MpAAT1 with other plant acyl transferases of known function.
• Fig. 3. Phylogram of plant acyl transferases of known function, including MpAAT1.
• Fig. 4. Semi-purification of MpAAT1 produced in E. coli.
• In vivo recombinant MpAAT1 volatile trapping experiments
• Fig. 5. Influence of temperature on recombinant semipurified MpAAT1 protein.
• Table 1. Substrates utilized by MpAAT1 recombinant enzyme.
• Table 2. Effect of metal ions and reducing agents on the activity of semipurified recombinant MpAAT1.
• Effect of pH, temperature and ionic strength on MpAAT1 activity
• Activity of MpAAT1 with different substrates
• Table 3. Kinetic properties of semipurified recombinant MpAAT1 protein.
• Discussion
• Fruit produce a range of volatile compounds that make up their characteristic aromas…
• Experimental procedures
• Bioinformatics and molecular biology
• MpAAT1 overexpression construct
• Expression of MpAAT1 recombinant protein in E. coli
• LC-MS analysis of proteins
• Headspace analysis of recombinant MpAAT1 activity
• Enzymatic characterization of the recombinant MpAAT1
• Acknowledgements
• References