Báo cáo Y học: Activation of transcription of the human presenilin 1 gene by 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate

Activation of transcription of the human presenilin 1 gene by 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate

Tác giả: Martine Pastorcic and Hriday K. Das

Lĩnh vực: Pharmacology & Neuroscience, Molecular Biology & Immunology, Institute of Cancer Research

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá cơ chế điều hòa biểu hiện gen presenilin 1 (PS1) ở người, đặc biệt là vai trò của 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA). TPA, một chất kích hoạt protein kinase C (PKC) và yếu tố phiên mã AP1, đã được chứng minh là làm tăng biểu hiện mRNA và protein của PS1 trong các tế bào thần kinh SK-N-SH. Tuy nhiên, TPA không ảnh hưởng đến biểu hiện PS1 ở tế bào gan HepG2, cho thấy sự điều hòa này có thể đặc hiệu với tế bào. Phân tích các đoạn promoter của gen PS1 cho thấy TPA kích hoạt phiên mã thông qua một cơ chế không nhất thiết yêu cầu các yếu tố Ets hoặc CREB/AP1 cụ thể. Các thí nghiệm EMSA chỉ ra rằng TPA làm thay đổi tương tác protein-DNA trong vùng promoter -22/+6, có khả năng liên quan đến sự điều hòa gián tiếp của các yếu tố phiên mã như Ets1/2.

Mục lục chi tiết:

• Activation of transcription of the human presenilin 1 gene by 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate
• Introduction
• Keywords
• EXPERIMENTAL PROCEDURES
• Northern blot analysis
• Nuclear run off analysis of transcripts initiated during TPA treatment
• Transfection assays
• Electrophoretic mobility shift assays
• Western blotting
• RESULTS
• TPA treatment increases the level of PS1 mRNA in SK-N-SH cells
• TPA increases the rate of transcription initiation of the PS1 gene in SK-N-SH cells
• PS1 protein level increases with TPA
• DNA sequences required to confer activation of transcription of PS1 by TPA
• Changes in DNA protein interactions over the -22/+6 region of the PS1 promoter in nuclear extracts from SK-N-SH cells treated with TPA
• DISCUSSION
• ACKNOWLEDGEMENT
• REFERENCES