Báo cáo Y học: Human sprouty 4, a new ras antagonist on 5q31, interacts with the dual specificity kinase TESK1

Human Sprouty 4, a New Ras Antagonist on 5q31, Interacts with the Dual Specificity Kinase TESK1

Tác giả: Onno C. Leeksma, Tanja A. E. van Achterberg, Yoshikazu Tsumura, Jiro Toshima, Eric Eldering, Wilma G. M. Kroes, Clemens Mellink, Marcel Spaargaren, Kensaku Mizuno, Hans Pannekoek, and Carlie J. M. de Vries

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc phát hiện và đặc tính hóa một gen sprouty mới của con người, được gọi là human sprouty 4 (hspry4), và tương tác của nó với kinase TESK1. Hspry4 được xác định là một chất đối kháng ras có khả năng ức chế tín hiệu MAP kinase do thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) và yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF) kích hoạt. Nghiên cứu cũng xác định protein kinase TESK1 như một đối tác của hspry4, với sự tương tác này được tăng cường bởi yếu tố tăng trưởng. Sự cộng định vị và tương tác trong ống nghiệm của hspry4 và TESK1 cho thấy một vai trò tiềm năng trong việc điều chỉnh tín hiệu tế bào.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and Methods
• DNA sequence analysis
• In vitro transcription-translation
• Eukaryotic expression plasmids
• Cell culture and transfection
• MAP kinase assay
• Raf-RBD GST pulldown
• Yeast two-hybrid assay
• Hspry4-TESK1 coimmunoprecipitation
• Intracellular localization
• Results
• Induction of smag-84 mRNA and tissue distribution
• Characteristics of the hspry4 gene
• Amino-acid sequence of hspry4
• Inhibition of MAP kinase activation
• Ras inhibition
• Hspry4 interacts with testicular protein kinase 1
• Discussion
• Acknowledgements
• References