Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 130 trang
Dung lượng: 1 MB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực mô phỏng lên sự tăng sinh và cấu trúc khung xương của tế bào hạt nang noãn heo

Tác giả: Trương Xuân Đại

Lĩnh vực: Công nghệ sinh học

Nội dung tài liệu:
Luận án này tập trung nghiên cứu ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực mô phỏng đến sự tăng sinh và cấu trúc khung xương của tế bào hạt nang noãn heo (pGC) trong môi trường in vitro. Nghiên cứu nhằm xác định các thay đổi về mặt hình thái, sự tăng sinh, quá trình apoptosis và các yếu tố điều hòa chu kỳ tế bào, cũng như các protein cấu trúc của tế bào pGC dưới tác động của điều kiện vi trọng lực mô phỏng. Kết quả nghiên cứu cung cấp cái nhìn sâu sắc về vai trò của vi trọng lực lên sự phát triển và chức năng của tế bào, góp phần bổ sung kiến thức trong lĩnh vực công nghệ sinh học.

Mục lục chi tiết:

  • Lời cam đoan
  • Lời cảm ơn
  • Mục lục
  • Danh mục các chữ viết tắt
  • Danh mục bảng
  • Danh mục hình
  • Mở đầu
  • Chương 1. Tổng quan
    • 1.1. Giới thiệu về vi trọng lực và vi trọng lực mô phỏng
      • 1.1.1. Vi trọng lực
      • 1.1.2. Vi trọng lực mô phỏng
    • 1.2. Các thí nghiệm không gian
    • 1.3. Những thay đổi diễn ra trong các chuyến bay ngoài không gian
      • 1.3.1. Ảnh hưởng của vi trọng lực lên sức khỏe sinh sản
      • 1.3.2. Ảnh hưởng đối với cá thể cái
    • 1.4. Ảnh hưởng của vi trọng lực lên sự thụ tinh và thai kỳ
    • 1.5. Các thiết bị vi trọng lực mô phỏng
      • 1.5.1. Clinostat
      • 1.5.2. Buồng quay
      • 1.5.3 Máy định vị ngẫu nhiên
      • 1.5.4. Hệ thống nâng nghịch từ
    • 1.6. Tổng quan về noãn và tế bào hạt nang noãn heo
      • 1.6.1. Sơ lược về cấu tạo buồng trứng
      • 1.6.2. Sự hình thành và trưởng thành của noãn
      • 1.6.3. Sự hình thành và phát triển của nang noãn
        • 1.6.3.1 Sự hình thành của nang noãn
        • 1.6.3.2 Sự phát triển của nang noãn
      • 1.6.4. Tế bào hạt nang noãn
        • 1.6.4.1 Nguồn gốc và cấu tạo
        • 1.6.4.2 Chức năng
    • 1.7. Sự tăng sinh và chu kỳ tế bào
      • 1.7.1. Chu kỳ tế bào
      • 1.7.2. Các giai đoạn trong chu kỳ tế bào nhân chuẩn
      • 1.7.3. Các kinase phụ thuộc cycline điều khiển chu kỳ tế bào
      • 1.7.4. Sự chết theo chương trình (apoptosis)
      • 1.7.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của vi trọng lực lên sự tăng sinh của tế bào
    • 1.8. Khung xương tế bào
      • 1.8.1. Tổ chức và cấu trúc khung xương tế bào
      • 1.8.2. Những nghiên cứu về ảnh hưởng của vi trọng lực lên khung xương tế bào
  • Chương 2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
    • 2.1. Vật liệu
      • 2.1.1. Tế bào hạt nang noãn heo
      • 2.1.2. Thiết bị và dụng cụ cần thiết
      • 2.1.3. Hệ thống vi trọng lực mô phỏng
    • 2.2. Phương pháp nghiên cứu
      • 2.2.1. Nuôi cấy tế bào
        • 2.2.1.1. Thu mẫu buồng trứng
        • 2.2.1.2. Phương pháp thu nhận nang noãn đơn
        • 2.2.1.3. Phương pháp thu nhận và nuôi cấy pGC
        • 2.2.1.4. Phương pháp cấy chuyền pGC
      • 2.2.2. Phương pháp nhuộm nhân pGC
      • 2.2.3. Phương pháp thử nghiệm vi trọng lực
        • 2.2.3.1. Tế bào nuôi trong đĩa 96 giếng
        • 2.2.3.2. Tế bào nuôi trong đĩa T25
      • 2.2.4. Phương pháp đánh giá sự tăng sinh tế bào
        • 2.2.4.1. Đánh giá mật độ tế bào bằng phương pháp WST-1
        • 2.2.4.2. Đánh giá chu kỳ tế bào, biểu hiện dịch mã
      • 2.2.5. Phương pháp đánh giá quá trình tế bào chết theo chương trình
        • 2.2.5.1. Đánh giá tỉ lệ tế bào chết theo chương trình bằng phương pháp tế bào dòng chảy
        • 2.2.5.2. Đánh giá biểu hiện phiên mã của các gen apoptosis
      • 2.2.6. Phương pháp đánh giá sự thay đổi hình thái tế bào
        • 2.2.6.1. Phương pháp đánh giá hình thái nhân
        • 2.2.6.2. Phương pháp đánh giá hình thái tế bào chất
      • 2.2.7. Phương pháp đánh giá sự thay đổi cấu trúc khung xương tế bào
        • 2.2.7.1. Đánh giá biểu hiện phiên mã các gene vi ống, vi sợi
        • 2.2.7.2. Đánh giá biểu hiện dịch mã các gene vi ống, vi sợi
      • 2.2.8. Phương pháp thống kê
  • Chương 3. Kết quả và thảo luận
    • 3.1. Kết quả thu nhận và nuôi cấy tế bào pGC
      • 3.1.1. Kết quả thu nhận nang trứng và tế bào pGC
      • 3.1.2. Kết quả nuôi cấy, cấy chuyền và tăng sinh tế bào pGC
    • 3.2. Kết quả đánh giá sự tăng sinh của pGC dưới điều kiện vi trọng lực
      • 3.2.1. Kết quả đánh giá sự thay đổi mật độ tế bào bằng WST-1
      • 3.2.2. Kết quả đánh giá sự thay đổi mật độ tế bào bằng phần mềm Cytell
      • 3.2.3. Kết quả đánh giá chu kỳ tế bào
        • 3.2.3.1. Kết quả đánh giá tỉ lệ các pha
        • 3.2.3.2. Kết quả đánh giá biểu hiện phiên mã cdk4, cdk6
        • 3.2.3.3. Kết quả đánh giá biểu hiện phiên mã cyclin A, cyclin D
        • 3.2.3.4. Kết quả đánh giá dịch mã của Cdk4 và Cdk6
        • 3.2.3.5. Kết quả đánh giá dịch mã của Cyclin A, Cyclin D
    • 3.3. Kết quả đánh giá quá trình apoptosis
      • 3.3.1. Kết quả đánh giá tỉ lệ apoptosis
      • 3.3.2. Kết quả đánh giá biểu hiện phiên mã của các gene apoptosis
    • 3.4. Kết quả đánh giá sự thay đổi hình thái tế bào
      • 3.4.1. Kết quả đánh giá sự thay đổi hình thái nhân
      • 3.4.2 Kết quả đánh giá các dạng hình thái tế bào hạt
    • 3.5. Kết quả đánh giá sự thay đổi cấu trúc khung xương tế bào
      • 3.5.1. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực lên vi ống
        • 3.5.1.1. Đánh giá sự thay đổi của vi ống ở mức phiên mã
        • 3.5.1.2. Đánh giá sự thay đổi cấu trúc vi ống
        • 3.5.1.3. Đánh giá sự thay đổi của vi ống ở mức dịch mã
      • 3.5.2. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của điều kiện vi trọng lực lên vì sợi
        • 3.5.2.1. Đánh giá sự thay đổi của vi sợi ở mức phiên mã
        • 3.5.2.2. Đánh giá sự thay đổi cấu trúc vì sợi
        • 3.5.2.3. Đánh giá sự thay đổi của vi sợi ở mức dịch mã
  • Kết luận
  • Kiến nghị
  • Danh mục công trình của tác giả
  • Tài liệu tham khảo
  • Phụ lục