Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 27 trang
Dung lượng: 529 KB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu Phân Lập và Biểu Hiện Gen Mã Hóa Protein Độc Tố Diệt Sâu Đục Quả Đậu Tương (Etiella zinckenella Treitschke) Từ Vi Khuẩn Bacillus thuringiensis Bản Địa

Tác giả: Lê Thu Ngọc

Lĩnh vực: Sinh học ứng dụng

Nội dung tài liệu: Luận án Tiến sĩ này tập trung vào việc nghiên cứu phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein độc tố từ vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt) bản địa, có khả năng diệt sâu đục quả đậu tương Etiella zinckenella Treitschke. Đậu tương là cây trồng quan trọng nhưng thường bị thiệt hại nặng nề do sâu bệnh, đặc biệt là sâu đục quả. Thuốc trừ sâu sinh học Bt được ứng dụng rộng rãi nhờ hiệu quả và tính thân thiện với môi trường. Nghiên cứu này nhằm sàng lọc các chủng Bt bản địa Việt Nam có hoạt tính diệt sâu cao, giải trình tự hệ gen để xác định các gen độc tố mới, phân lập và biểu hiện các gen này trong E. coli, đồng thời đánh giá khả năng diệt sâu của protein tái tổ hợp. Ngoài ra, luận án còn đề cập đến việc cải biến mã di truyền và biểu hiện gen cry2Ab39 trong lá cây thuốc lá N. benthamiana.

Mục lục chi tiết:

  • MỞ ĐẦU
  • CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN
    • 1.1. Đậu tương và côn trùng gây hại
      • Tầm quan trọng của cây đậu tương
      • Sâu đục quả đậu tương Etiella zinckenella Treitschke và biện pháp phòng trừ
    • 1.2. Protein độc tố diệt côn trùng có nguồn gốc từ Bacillus thuringiensis
      • Phân loại và danh pháp
      • Hoạt tính và phổ diệt côn trùng
      • Cấu trúc protein Cry
      • Cơ chế diệt côn trùng
    • 1.3. Một số thành tựu về tạo cây đậu tương chuyển gen kháng sâu
  • CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
    • 2.1. VẬT LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ
    • 2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
      • 2.2.1. Sàng lọc các chủng Bt có hoạt tính diệt sâu đục quả đậu tương
      • 2.2.2. Giải trình tự hệ gen vi khuẩn Bt bằng công nghệ SMRT sequencing của PacBio và khai thác cơ sở dữ liệu hệ gen Bt để tìm các gen mã hóa protein độc tố diệt sâu bằng công cụ tin sinh học
      • 2.2.3. Phương pháp phân lập, tách dòng gen
      • 2.2.4. Biểu hiện gen mã hóa protein độc tố diệt côn trùng trong hệ biểu hiện E. coli BL21 và đánh giá hoạt lực diệt sâu của protein tái tổ hợp
      • 2.2.5. Cải biến mã di truyền và biểu hiện gen cry2Ab39 trong lá cây thuốc lá N. benthamiana bằng công nghệ biểu hiện gen tạm thời thông qua Agrobacterium tumefaciens
  • CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
    • 3.1. Kết quả sàng lọc chủng Bt có hoạt lực diệt sâu đục quả đậu tương cao từ các chủng trong bộ sưu tập Bt bản địa của Việt Nam
      • Kết quả hoạt hóa và nhân nuôi thu sinh khối các chủng Bt
      • Kết quả thử khả năng diệt sâu đục quả đậu tương của các chủng Bt nghiên cứu.
    • 3.2. Phân tích, xác định các gen độc tố Bt mới tiềm năng từ cơ sở dữ liệu trình tự hệ gen của 4 chủng Bt có độc lực cao với sâu đục quả đậu tương