Báo cáo khoa học: The unique sites in SulA protein preferentially cleaved by ATP-dependent Lon protease from Escherichia coli

Unique cleavage sites in SulA protein preferentially cleaved by ATP-dependent Lon protease from Escherichia coli

Tác giả: Wataru Nishii, Takafumi Maruyama, Rieko Matsuoka, Tomonari Muramatsu, and Kenji Takahashi

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Khoa học sự sống

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này điều tra tính đặc hiệu cắt của protease Lon đối với protein SulA từ vi khuẩn Escherichia coli. Các nhà khoa học đã xác định các vị trí cắt ưu tiên, đặc biệt là ở vùng trung tâm và một phần vùng C-terminal của SulA, những vùng này đóng vai trò quan trọng đối với chức năng của protein. Sự cắt ưu tiên này được cho là giúp thúc đẩy quá trình phân giải protein SulA phụ thuộc ATP một cách nhanh chóng và rộng rãi hơn. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng ATP cần thiết để phá vỡ cấu trúc bậc cao của protein trước khi diễn ra quá trình cắt.

Mục lục chi tiết:

• Preparation of SulA3–169, SulA23–169 and maltose binding protein (MBP)
• SDS/PAGE analysis
• CD spectroscopy
• In vitro Lon protease assay
• Identification of the peptide fragments by LC-MS
• Sequencing and quantitative analysis of the peptides
• Preparation of SulA3-169
• Identification of the peptide fragments and determination of cleavage sites
• DISCUSSION
• ACKNOWLEDGEMENTS
• REFERENCES