Báo cáo khoa học: Identification of hepatopoietin dimerization, its interacting regions and alternative splicing of its transcription

Identification of Hepatopoietin Dimerization, its Interacting Regions and Alternative Splicing of its Transcription

Tác giả: Yong Li, Kaihua Wei, Chengrong Lu, Yingxian Li, Ming Li, Guichun Xing, Handong Wei, Qingming Wang, Jizhong Chen, Chutse Wu, Huipeng Chen, Songcheng Yang and Fuchu He

Lĩnh vực: Department of Genomics and Proteomics, Beijing Institute of Radiation Medicine, Chinese National Human Genome Center, China; National Center of Biomedical Analysis of China, Beijing, China

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định cơ chế tự hợp của hepatopoietin (HPO), một yếu tố tăng trưởng gan mới của con người. Sử dụng hệ thống hai mặt lai men (yeast two-hybrid), các nhà nghiên cứu đã phát hiện ra rằng HPO có thể tự tương tác, tạo thành thể lưỡng phân (dimer), và một dạng HPO được nối tắt thay thế (alternatively spliced form) có tên là HPO23 cũng được xác định là tương tác với HPO. Điều này cho thấy HPO có thể tồn tại dưới dạng thể lưỡng phân đồng thể (homodimer) hoặc thể lưỡng phân dị thể (heterodimer). Các kết quả thực nghiệm tiếp theo bằng sắc ký khối phổ (mass spectrometry) và phân tích Western blot đã xác nhận rằng HPO tái tổ hợp tồn tại dưới dạng thể lưỡng phân đồng thể và có hai dạng isoform (15 kDa và 23 kDa) trong các tế bào gan. Các vùng đầu tận N (N-terminus) và đầu tận C (C-terminus) của HPO được xác định là thiết yếu cho sự hình thành thể lưỡng phân. Nghiên cứu cũng gợi ý rằng HPO có thể được dimer hóa thông qua liên kết disulfide, liên quan đến các cysteine trong cấu trúc của nó.

Mục lục chi tiết:

• Identification of hepatopoietin dimerization, its interacting regions and alternative splicing of its transcription
• Identification of HPO homodimer in vitro by SDS/PAGE under denaturing condition
• GST pull down experiments
• Identification of HPO homodimer in intact cell
• Identification of HPO dimerization by yeast two hybrid system
• Identification of molecular mass of recombinant human HPO by mass spectrometry
• Identification of interacting region(s) of HPO in its homodimer.
• The dimerization of HPO might be dependent on its secondary structure
• Recombinant human HPO exists naturally in homodimer form
• Demonstration of autonomous formation of HPO homodimer in vitro
• An alternatively spliced transcript of HPO was identified
• The presence of the 23 kDa form of HPO was confirmed in human liver tissues
• DISCUSSION
• ACKNOWLEDGEMENTS
• REFERENCES