Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 216 KB

Giới thiệu nội dung

Characterization of the Promoter for the Mouse α3 Integrin Gene: Involvement of the Ets-Family of Transcription Factors in the Promoter Activity

Tác giả: Takumi Kato, Kouji Katabami, Hironori Takatsuki, Seon Ae Han, Ken-ichi Takeuchi, Tatsuro Irimura, and Tsutomu Tsuji

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Di truyền học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và phân tích vùng promoter của gen α3 integrin ở chuột. Các nhà khoa học đã xác định một đoạn DNA khoảng 4 kb ở vùng 5′-lân cận của gen này và phân tích hoạt tính promoter của nó. Kết quả cho thấy một đoạn 537 bp là đủ để thúc đẩy biểu hiện gen ở mức độ cao. Nghiên cứu cũng xác định các vị trí bắt đầu phiên mã chính và phụ, đồng thời phát hiện sự hiện diện của hộp CCAAT nhưng thiếu hộp TATA. Phân tích sâu hơn cho thấy vùng promoter từ -260 đến -119 bp (so với vị trí bắt đầu phiên mã chính) là cần thiết cho phiên mã hiệu quả. Sự hiện diện của các trình tự đồng thuận cho các yếu tố phiên mã như Ets, GATA và MyoD/E-box đã được xác định. Đặc biệt, việc gây đột biến trên một trong các trình tự liên kết Ets đã làm giảm đáng kể hoạt tính promoter, cho thấy rằng biểu hiện gen α3 integrin ở các tế bào ung thư biểu mô này được điều hòa bởi các yếu tố phiên mã thuộc họ Ets.

Mục lục chi tiết:

  • Materials and Methods
  • Reagents
  • Cells
  • Flow cytometric analysis
  • Cloning of the 5′-flanking region of mouse integrin α3 subunit gene
  • Construction of reporter plasmids
  • Determination of transcription start sites
  • Electrophoretic mobility shift assay (EMSA)
  • Results
  • Structure and transient expression analysis of the 5′-flanking region of mouse integrin α3 subunit gene
  • Promoter activity of deletions and mutations derived from the 5′-flanking segment
  • Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) using the Ets consensus site at -133
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References