Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 8 trang
Dung lượng: 162 KB

Giới thiệu nội dung

Association of human tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand with membrane upon acidification

Tác giả: Gyu Hyun Nam and Kwan Yong Choi

Lĩnh vực: Molecular and Life Sciences, Protein Folding and Engineering

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khảo sát sự thay đổi cấu trúc của protein yếu tố hoại tử khối u liên quan đến apoptosis (TRAIL) ở điều kiện pH axit và ý nghĩa sinh học của những thay đổi này đối với tương tác với màng lipid. Kết quả cho thấy ở pH dưới 4.5, TRAIL chuyển sang trạng thái giống “molten globule” (MG-like state), với sự thay đổi cấu trúc bậc hai và bậc ba. Trạng thái MG-like này làm tăng khả năng gắn kết của TRAIL với liposome và tăng tốc độ giải phóng thuốc nhuộm huỳnh quang khỏi liposome, cho thấy TRAIL có thể làm màng trở nên thấm hơn. Những thay đổi cấu trúc này, bao gồm cả việc hình thành các a-helices không điển hình và sự tiếp xúc của các gốc tryptophan với dung môi, tương tự như các quan sát được báo cáo đối với các protein cùng họ TNF như TNF-α và lymphotoxin. Điều này cho thấy các đặc tính nội tại của TRAIL dưới điều kiện pH axit có thể đóng vai trò quan trọng trong tương tác với màng, tương tự như các protein họ TNF khác.

Mục lục chi tiết:

  • EXPERIMENTAL PROCEDURES
  • Preparation of recombinant human TRAIL
  • CD spectroscopy
  • Fluorescence measurements
  • ANS binding assay
  • Liposome preparation
  • Liposome binding assay
  • Leakage assay
  • RESULTS
  • Structural analyses of TRAIL by CD spectroscopy
  • Thermal denaturation at neutral and acidic pH values
  • Fluorescence spectroscopy
  • Interaction with ANS
  • Binding of TRAIL to liposome membrane
  • Release of liposome-entrapped dye induced by TRAIL
  • DISCUSSION
  • ACKNOWLEDGMENTS
  • REFERENCES