Báo cáo khoa học: Lysosomal enzymes promote mitochondrial oxidant production, cytochrome c release and apoptosis

Lysosomal enzymes promote mitochondrial oxidant production, cytochrome c release and apoptosis

Tác giả: Ming Zhao, Fernando Antunes, John W. Eaton, Ulf T. Brunk

Lĩnh vực: Biochemistry, Cell Biology, Apoptosis research

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối liên hệ giữa sự phá vỡ lysosome và quá trình chết theo chương trình (apoptosis) của tế bào. Cụ thể, các enzyme từ lysosome được giải phóng ra ngoài có thể kích thích sản xuất các loại oxy phản ứng (ROS) trong ty thể, dẫn đến giải phóng cytochrome c và cuối cùng là apoptosis. Nghiên cứu sử dụng một chất tẩy lysosomotropic tổng hợp, MSDH, để gây ra sự phá vỡ lysosome và apoptosis. Kết quả chỉ ra rằng các enzyme lysosomal, khi được giải phóng, có thể tấn công trực tiếp ty thể hoặc kích hoạt phospholipase A2 (PLA2), từ đó thúc đẩy sản xuất ROS và giải phóng cytochrome c.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Cell cultures
• Apoptosis assays
• Actin staining
• Evaluation of oxidative stress
• Preparation of rat liver lysosome-mitochondria enriched fraction
• Preparation of a purified mitochondria fraction
• Enzymatic detection of lysosomal integrity and estimation of fraction purity
• Mitochondrial generation of H2O2
• Western blotting for cytochrome c
• Results
• Discussion
• Acknowledgements
• References