Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 199 KB

Giới thiệu nội dung

Overexpression and enzymatic characterization of Neisseria gonorrhoeae penicillin-binding protein 4

Tác giả: Miglena E. Stefanova, Joshua Tomberg, Christopher Davies, Robert A. Nicholas, William G. Gutheil
Lĩnh vực: Vi sinh vật học, Hóa sinh, Dược học
Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này tập trung vào việc biểu hiện quá mức, tinh sạch và đặc tính hóa enzym penicillin-binding protein 4 (NG PBP 4) từ vi khuẩn Neisseria gonorrhoeae. NG PBP 4, một loại PBP có khối lượng phân tử thấp, đã được phân tích các hoạt tính liên kết với β-lactam, hoạt tính DD-carboxypeptidase, đặc tính nhận diện cơ chất, hoạt tính transpeptidase, độ nhạy với các chất ức chế và ảnh hưởng của pH. Kết quả cho thấy NG PBP 4 có khả năng acyl hóa hiệu quả bởi penicillin và thể hiện sự khác biệt đáng kể về đặc tính nhận diện cơ chất, với xu hướng ưu tiên các cơ chất N-acyl hóa. Hoạt tính chống lại cơ chất depsipeptide cao hơn đáng kể so với cơ chất peptide tương tự, cho thấy hoạt tính acyl hóa là bước giới hạn tốc độ. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng NG PBP 4 không thể hiện hoạt tính transpeptidase trong các điều kiện thử nghiệm. Một số tác nhân tác động vào vị trí hoạt động đã ức chế đáng kể hoạt tính của enzym. Phân tích hồ sơ pH cho thấy hoạt tính tối ưu trong khoảng 7.5-9.0, với các giá trị pKa là 6.9 và 10.1. So sánh các đặc tính enzym của NG PBP 4 với các DD-carboxypeptidase khác làm nổi bật những điểm tương đồng và khác biệt, gợi ý vai trò cơ chế chung của hai gốc lysine được bảo tồn cao ở vị trí hoạt động trong các PBP khối lượng phân tử thấp thuộc nhóm A và C.
Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Quy trình thực nghiệm
  • Hoạt tính liên kết với β-lactam
  • Đặc tính nhận diện cơ chất
  • Hoạt tính transpeptidase
  • Độ pH tối ưu và độ ổn định
  • Tác dụng của chất ức chế và các tác nhân
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo