Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 215 KB

Giới thiệu nội dung

Active-site Residues and Amino Acid Specificity of the Bacterial 4′-Phosphopantothenoylcysteine Synthetase CoaB

Tác giả: Thomas Kupke

Lĩnh vực: Hóa sinh học, Di truyền vi sinh vật

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tiếp tục khảo sát chi tiết miền CoaB của enzyme Dfp hai chức năng, chịu trách nhiệm xúc tác cho phản ứng thứ hai trong quá trình tổng hợp 4′-phosphopantothenoylcysteine (PPC). Các nhà nghiên cứu đã xác định thêm hai axit amin tại vị trí hoạt động, Arg206 và Ala276, đóng vai trò quan trọng trong phản ứng này. Nghiên cứu cũng đã xác nhận vai trò của Asn210, một axit amin đã được mô tả trước đó. Các đột biến tại các vị trí này đã làm giảm đáng kể hoạt tính xúc tác PPC của enzyme nhưng không ngăn cản sự hình thành chất trung gian 4′-phosphopantothenoyl-CMP. Chất trung gian này đã được đặc trưng bằng phổ khối MALDI-TOF, cho thấy nó đồng tinh khiết với các protein mutant His-CoaB N210H và N210K. Điều này gợi ý rằng các mutant này sẽ rất hữu ích cho việc làm sáng tỏ cấu trúc tinh thể của CoaB khi phức hợp với chất trung gian phản ứng. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng enzyme CoaB của vi khuẩn không hoàn toàn đặc hiệu với cysteine và có thể kết hợp các dẫn xuất của cysteine. Ngoài ra, phân tích đột biến nhiệt độ nhạy cảm dfp-1 của E. coli đã xác định sự thay thế của Ala275 bằng Threonine trong motif AAVAD được bảo tồn.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and methods
  • Results and discussion
  • Conclusions
  • Acknowledgements
  • References