Báo cáo khoa học: Conformational and functional analysis of the lipid binding protein Ag-NPA-1 from the parasitic nematode Ascaridia galli

Conformation, Ligand Binding, and Distribution of the Nematode Protein Ag-NPA-1

Tên đề tài: Conformational and functional analysis of the lipid binding protein Ag-NPA-1 from the parasitic nematode Ascaridia galli

Tác giả: Rositsa Jordanova, Georgi Radoslavov, Peter Fischer, Eva Liebau, Rolf D. Walter, Ilia Bankov, and Raina Boteva

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích cấu trúc, khả năng liên kết với phối tử và phân bố của protein Ag-NPA-1, một protein liên kết lipid có nguồn gốc từ tuyến trùng ký sinh Ascaridia galli. Các phương pháp phổ huỳnh quang, bao gồm cả FRET, đã được sử dụng để làm sáng tỏ cấu trúc bậc hai, sự tương tác với các axit béo và retinol, cũng như khoảng cách giữa các trung tâm huỳnh quang trong protein. Nghiên cứu cũng xác định vị trí của các gốc cysteine và vai trò của chúng trong cấu trúc và chức năng của protein. Phân tích miễn dịch hóa học và hiển vi điện tử miễn dịch vàng đã được tiến hành để xác định vị trí phân bố của Ag-NPA-1 trong cơ thể ký sinh trùng.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Conformational and oligomeric properties of Ag-NPA-1
• Role of Cys residues for Ag-NPA-1 conformation and function
• Intrinsic fluorescence properties of Ag-NPA-1
• Binding activities of Ag-NPA-1 determined by changes in Trp fluorescence
• FRET between Trp17 and DAUDA in Ag-NPA-1
• Immunohistology and Immunogold TEM
• Discussion
• Experimental procedures
• Protein purification
• Fluorescence resonance energy transfer
• MALDI-TOF analysis
• Data analysis and structure predictions
• Immunohistology and immunogold TEM
• Acknowledgements
• References