Báo cáo khoa học: Identification and characterization of four novel peptide motifs that recognize distinct regions of the transcription factor CP2

Identification and characterization of four novel peptide motifs that recognize distinct regions of the transcription factor CP2

Tác giả: Ho Chul Kang, Bo Mee Chung, Ji Hyung Chae, Sung-ll Yang, Chan Gil Kim, and Chul Geun Kim

Lĩnh vực: Khoa học đời sống, Dược lý, Công nghệ sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và mô tả bốn chuỗi peptide mới có khả năng nhận diện các vùng khác nhau của yếu tố phiên mã CP2. Bằng phương pháp sàng lọc thư viện hiển thị phage, các nhà nghiên cứu đã xác định được các motif peptide đồng nhất trong nhiều peptide liên kết với CP2, bao gồm HXPR, PHL, ASR và PXHXH. Các thử nghiệm tiếp theo đã xác nhận sự tương tác giữa các protein chứa motif HXPR như REST và YY1 với CP2. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng CP2 nhận biết các motif liên kết khác nhau thông qua việc sử dụng các vùng khác nhau trên phân tử, cho phép nó tương tác và điều hòa nhiều đối tác tế bào.

Mục lục chi tiết:

• Identification and characterization of four novel peptide motifs that recognize distinct regions of the transcription factor CP2
• Correspondence
• Keywords
• Abstract
• CP2; gene regulation; peptide motif; phage display; protein-protein interaction; transcription factor
• Identification of CP2-binding peptide motifs
• Results
• Isolation of CP2-binding phage clones through a phage display library screening
• Identification of CP2-binding motifs
• Mapping the sites of interaction between CP2 and each CP2-binding motif
• Recognition of proteins containing CP2-binding motifs and verification of the CP2-binding ability of REST and YY1 that contain the HXPR motif
• Discussion
• Experimental procedures
• Cell culture and luciferase assay
• Plasmid constructs
• Site-directed mutagenesis
• Purification of GST fusion proteins
• Peptide phage library screening
• Deduced peptide sequence determination
• Coimmunoprecipitation and GST pull-down assays
• Acknowledgements
• References