Báo cáo khoa học: The monopartite nuclear localization signal of autoimmune regulator mediates its nuclear import and interaction with multiple importin a molecules

The Monopartite Nuclear Localization Signal of Autoimmune Regulator Mediates Its Nuclear Import and Interaction with Multiple Importin α Molecules

Tác giả: Tanja Ilmarinen, Krister Melén, Hannele Kangas, Ilkka Julkunen, Ismo Ulmanen, and Petra Eskelin

Lĩnh vực: Miễn dịch học, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định tín hiệu định vị hạt nhân (NLS) chức năng của yếu tố điều hòa tự miễn (AIRE) và cơ chế nhập hạt nhân của nó. AIRE là một yếu tố phiên mã đóng vai trò quan trọng trong việc thiết lập dung nạp miễn dịch bản thân. Các đột biến trong gen AIRE có thể dẫn đến bệnh tự miễn đa nội tiết, bệnh nấm Candida và loạn sản ngoại bì (APECED). Nghiên cứu đã xác định rằng AIRE chứa một NLS đơn phân ở đầu tận cùng C, bao gồm các axit amin 131-133. Quan trọng hơn, AIRE tương tác với nhiều thành viên của họ thụ thể vận chuyển hạt nhân importin α, chủ yếu là α1, α3 và α5. Sự tương tác này phụ thuộc vào NLS chức năng của AIRE và xảy ra thông qua “vị trí liên kết nhỏ” của importin α3 và α5. Phát hiện này cho thấy rằng việc nhập hạt nhân của AIRE được thực hiện thông qua con đường importin α/β cổ điển.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Abbreviations
• Introduction
• Results and discussion
• The N-terminus of AIRE contains a monopartite NLS
• AIRE interacts with importin α in an NLS-dependent manner
• AIRE binds to the ‘minor’ binding site of importin α
• Experimental procedures
• Plasmid constructs and site-directed mutagenesis
• Cell culture and transfections
• Immunofluorescent cell staining and confocal microscopy
• Yeast two-hybrid assay
• GST pull-down assay
• Acknowledgements
• References