Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 244 KB

Giới thiệu nội dung

Molecular Basis for the Subunit Assembly of the Primase from an Archaeon Pyrococcus horikoshii

Tên đề tài: Molecular basis for the subunit assembly of the primase from an archaeon Pyrococcus horikoshii

Tác giả: Nobutoshi Ito, Ikuo Matsui, Eriko Matsui

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Cấu trúc phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày các kết quả nghiên cứu cấu trúc tinh thể và sinh hóa học về miền N-terminal (NTD) của protein PriL (PriLNTD) từ vi khuẩn cổ Pyrococcus horikoshii. Miền này tương tác với protein PriS, một thành phần nhỏ hơn trong phức hợp primase dị thể, cần thiết cho quá trình sao chép nhiễm sắc thể. Cấu trúc tinh thể của PriLNTD đã được xác định ở độ phân giải 2.9 Å, cho thấy nó bao gồm hai phân miền: phân miền xoắn và phân miền xoắn-lưới. Phân miền xoắn-lưới được xác định là vùng liên kết với PriS, với một vùng kỵ nước cụ thể (Tyr155-Tyr156-Ile157) đóng vai trò quan trọng trong sự tương tác này. Các thí nghiệm thay thế axit amin đã xác nhận rằng những tàn dư này là yếu tố quyết định chính đối với ái lực liên kết. Nghiên cứu này cung cấp cái nhìn sâu sắc về cơ chế phân tử cho sự lắp ráp phức hợp primase dị thể.

Mục lục chi tiết:

  • Abstract
  • Introduction
  • Keywords
  • Correspondence
  • Database
  • Results: PriLNTD is a PriS-binding module
  • Overall structure of PhoPriLNTD
  • Conformational change and molecular disorder of PriLNTD
  • PriS binding is mediated by SD2 in PriLNTD
  • Cooperative function of the Tyr155-Tyr156-Ile157 residues to Pris interaction
  • Discussion: Structure-based mutagenesis reveals mechanism of PriLNTD interaction with PriS
  • Implications for PriS–PriL heterodimer assembly
  • Experimental procedures
  • Plasmids and constructs
  • Purification and crystallization for structure determination
  • Data collection, structure determination, and refinement
  • GST pull-down analysis
  • Sample preparation and measurement of CD spectroscopy
  • Surface plasmon resonance
  • Model construction
  • Acknowledgements
  • References