Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 271 KB

Giới thiệu nội dung

Structural Basis For Cyclodextrin Recognition By Thermoactinomyces Vulgaris Cyclo/Maltodextrin-Binding Protein

Tác giả: Takashi Tonozuka, Akiko Sogawa, Mitsugu Yamada, Naoki Matsumoto, Hiromi Yoshida, Shigehiro Kamitori, Kazuhiro Ichikawa, Masahiro Mizuno, Atsushi Nishikawa, Yoshiyuki Sakano

Lĩnh vực: Khoa học sinh học ứng dụng, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày cơ sở cấu trúc cho sự nhận diện cyclodextrin của protein liên kết cyclo/maltodextrin từ Thermoactinomyces vulgaris (TvuCMBP). TvuCMBP, tương tự như các protein liên kết đường khác ở vi khuẩn, bao gồm hai domain (N và C) liên kết với nhau qua một vùng bản lề. Cấu trúc tinh thể của TvuCMBP phức hợp với γ-cyclodextrin đã được xác định và cho thấy nó ở dạng đóng, trái ngược với dạng mở của protein liên kết maltodextrin từ E. coli khi phức hợp với β-cyclodextrin. Sự khác biệt đáng chú ý nằm ở vị trí và cấu trúc của các vòng trong domain N, đặc biệt là sự hiện diện của Leu59 nhô ra, đóng vai trò quan trọng trong việc liên kết với khoang kỵ nước của γ-cyclodextrin. Ngoài ra, khe liên kết đường của TvuCMBP rộng hơn so với EcoMBP, cho thấy sự phù hợp với việc gắn kết cyclodextrin.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả và Thảo luận
  • Cơ sở cấu trúc cho sự nhận diện cyclodextrin bởi protein liên kết cyclo/maltodextrin của Thermoactinomyces vulgaris
  • Cấu trúc tổng thể của TvuCMBP
  • Cấu trúc tinh thể của TvuCMBP phức hợp với γ-CD
  • So sánh các phần domain N của vị trí liên kết đường của TvuCMBP, EcoMBP và TliTMBP
  • Đánh giá ái lực liên kết bằng phép đo huỳnh quang
  • Các quy trình thực nghiệm
  • Xây dựng plasmid biểu hiện
  • Sản xuất TvuCMBP
  • Kết tinh và thu thập dữ liệu
  • Phân pha và tinh chỉnh
  • Phép đo huỳnh quang
  • Tài liệu tham khảo