Báo cáo khoa học: Mutagenesis of the central hydrophobic cluster in Ab42 Alzheimer’s peptide Side-chain properties correlate with aggregation propensities

Mutagenesis of the central hydrophobic cluster in Aβ42 Alzheimer’s peptide

Tác giả: Natalia Sánchez de Groot, Francesc X. Aviles, Josep Vendrell and Salvador Ventura

Lĩnh vực: Bioquímica, Biologia Molecular, Biotecnologia, Biomedicina

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khảo sát sự ảnh hưởng của các đột biến tại vùng trung tâm kỵ nước (central hydrophobic cluster – CHC) của peptide β-amyloid 42 (Aβ42) đối với khả năng kết tụ của nó. Sử dụng protein huỳnh quang xanh (GFP) làm chỉ thị, các nhà khoa học đã đánh giá tác động của các thay đổi chuỗi bên tại vị trí đột biến lên đặc tính vật lý hóa học và xu hướng hình thành tập hợp của Aβ42. Kết quả cho thấy sự tương quan chặt chẽ giữa các đặc tính của chuỗi bên (như tính kỵ nước, xu hướng tạo cấu trúc β-sheet) và khả năng kết tụ của peptide, từ đó cung cấp cái nhìn sâu sắc về vai trò của vùng CHC trong quá trình lắng đọng Aβ42 và giả thuyết rằng trình tự peptide quyết định khả năng kết tụ của các polypeptide.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Keywords
• Correspondence
• Abbreviations
• Results
• Expression, solubility and fluorescence of Phe19 mutants in Aβ42-GFP fusions
• Amyloidogenic properties of WT and F19D Aβ42 peptides
• Secondary structure
• Binding to amyloid-specific dyes
• Electron microscopy
• Correlation between fluorescence emission and side chain properties
• Hydrophobicity
• Propensity to form β-sheet
• Charge
• Prediction of fluorescence emission upon mutation
• Mutations associated with familial AD
• Discussion
• Experimental procedures
• Site-direct mutagenesis
• Expression of Aβ42–GFP mutants
• Fluorescence measurements
• Characterization of synthetic peptides
• Calculation of changes in intrinsic polypeptidic properties
• Correlation of fluorescence with polypeptide intrinsic properties
• Acknowledgements
• References
• Supplementary material