Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 179 KB

Giới thiệu nội dung

Characterization of Mycobacterium tuberculosis nicotinamidase/pyrazinamidase

Tác giả: Hua Zhang, Jiao-Yu Deng, Li-Jun Bi, Ya-Feng Zhou, Zhi-Ping Zhang, Cheng-Gang Zhang, Ying Zhang, Xian-En Zhang

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc làm sáng tỏ đặc tính của enzyme nicotinamidase/pyrazinamidase (PncA) từ vi khuẩn Mycobacterium tuberculosis. PncA đóng vai trò quan trọng trong việc hoạt hóa thuốc chống lao pyrazinamide (PZA). Nghiên cứu đã tiến hành biểu hiện và tinh sạch enzyme PncA, xác định các đặc tính như trọng lượng phân tử, độ pH và nhiệt độ tối ưu cho hoạt động xúc tác. Bên cạnh đó, các đột biến có hướng đích đã được tạo ra để xác định các axit amin thiết yếu cho hoạt động xúc tác và liên kết kim loại của enzyme. Phân tích hàm lượng kim loại cho thấy PncA của M. tuberculosis chứa mangan và sắt, khác với P. horikoshii PncA chỉ chứa kẽm. Nghiên cứu cũng xem xét ảnh hưởng của các ion kim loại khác nhau lên hoạt tính của enzyme. Kết quả cung cấp cái nhìn sâu sắc về cơ chế hoạt động và vai trò của PncA trong M. tuberculosis.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and chemicals
  • Strains and plasmids
  • Construction of pncA overexpression vector
  • In vitro mutagenesis
  • Protein overexpression and purification
  • Enzyme activity assay
  • Analytical ultracentrifugation
  • Mass spectrometry
  • Determination of optimum pH and temperature
  • CD analysis
  • Determinations of metal ion content
  • Acknowledgements
  • References
  • Supplementary material