Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 193 KB

Giới thiệu nội dung

Activity of Soluble OX40 Ligand is Enhanced by Oligomerization and Cell Surface Immobilization

Tác giả: Nicole Müller, Agnes Wyzgol, Sabine Münkel, Klaus Pfizenmaier, Harald Wajant

Lĩnh vực: Y học, Miễn dịch học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế tăng cường hoạt tính của OX40 ligand (OX40L) khi được tập hợp lại (oligomerization) hoặc cố định trên bề mặt tế bào. OX40L thuộc họ ligand yếu tố hoại tử khối u, đóng vai trò trong điều hòa miễn dịch và biệt hóa tế bào T. Nghiên cứu chỉ ra rằng OX40L dạng trimer hòa tan thường kém hoạt tính, nhưng hoạt tính này tăng đáng kể khi các trimer này được kết nối với nhau bằng kháng thể hoặc khi biểu hiện dưới dạng protein dung hợp hexamer. Đặc biệt, một protein dung hợp OX40L với mảnh kháng thể nhận diện kháng nguyên của mô u (fibroblast activation protein – FAP) cho thấy hoạt tính tăng cường phụ thuộc vào kháng nguyên bề mặt, mô phỏng hoạt tính của OX40L dạng màng khi gắn kết với kháng nguyên. Các protein dung hợp trimer OX40L mới này được đề xuất là các phân tử tăng cường miễn dịch có khả năng giảm thiểu tác dụng phụ toàn thân.

Mục lục chi tiết:

  • Expression, purification and molecular organization of soluble OX40L variants
  • Trimeric variants of soluble OX40L are practically inactive, but gain high activity after cross-linking
  • Cell surface antigen-mediated ‘immobilization’ confers high activity towards a trimeric single chain-OX40L fusion protein
  • Experimental procedures
  • Production and purification of recombinant proteins
  • Gelfiltration chromatography on BioSep-SEC-S3000
  • Flow cytometry with OX40L variants
  • IL-8 ELISA
  • Western blot detection of phosphorylated proteins