Báo cáo khoa học: Ca2+/calmodulin-dependent kinase II signalling cascade mediates P2X7 receptor-dependent inhibition of neuritogenesis in neuroblastoma cells

Ca²⁺/calmodulin-dependent kinase II signalling cascade mediates P2X7 receptor-dependent inhibition of neuritogenesis in neuroblastoma cells

Tên đề tài:

Ca²⁺/calmodulin-dependent kinase II signalling cascade mediates P2X7 receptor-dependent inhibition of neuritogenesis in neuroblastoma cells

Tác giả:

Rosa Gómez-Villafuertes, Ana del Puerto, Miguel Díaz-Hernández, Diego Bustillo, Juan I. Díaz-Hernández, Paula G. Huerta, Antonio R. Artalejo, Juan J. Garrido, and Mª Teresa Miras-Portugal

Lĩnh vực:

Sinh học phân tử, Khoa học thần kinh, Tế bào học

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này khám phá vai trò của thụ thể P2X7 trong việc điều chỉnh sự hình thành dây thần kinh (neuritogenesis) trong các tế bào u nguyên bào thần kinh Neuro-2a. Các nhà khoa học đã chứng minh rằng việc ức chế thụ thể P2X7 thúc đẩy sự phát triển của dây thần kinh, trong khi việc biểu hiện quá mức thụ thể P2X7 lại làm giảm sự hình thành dây thần kinh. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ cơ chế phân tử đằng sau hiện tượng này, liên quan đến chuỗi tín hiệu Ca²⁺/calmodulin-dependent kinase II (CaMKII), bao gồm các yếu tố hạ nguồn như focal adhesion kinase (FAK), Akt và glycogen synthase kinase 3 (GSK3). Kết quả nghiên cứu cung cấp cái nhìn sâu sắc về các con đường tín hiệu do thụ thể P2X7 kích hoạt, điều hòa sự hình thành dây thần kinh trong các tế bào u nguyên bào thần kinh.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Molecular characterization of purinergic P2X receptors in N2a cells
• Pharmacological characterization of P2X7 receptors in N2a cells
• Biophysical identification of P2X7 receptors in N2a cells
• Pharmacological block of P2X7 receptors facilitates N2a cell differentiation and the formation of neurites
• Knockdown of the P2X7 receptor induces neurite formation and P2X7 overexpression blocks neuritogenesis in N2a cells
• CaMKII-dependent signalling is modulated by P2X7 receptors in N2a cells
• Involvement of FAK in BBG-mediated neurite formation in N2a cells
• PI3K-dependent signalling is modulated by P2X7 receptors in N2a cells
• Discussion
• Experimental procedures
• Chemicals and antibodies
• Cell culture
• Transfections
• RT-PCR and quantitative real-time PCR
• Western blotting
• Calcium microfluorimetric analysis in single cells
• Intracellular calcium fluorimetric analysis in cellular suspensions
• Electrophysiological recordings
• Immunocytochemistry
• Statistical analysis
• Acknowledgements
• References