TINH SẠCH ENZYME BROMELAIN TỪ THÂN DỨA (Ananas comosus (L.) Merr.) BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION

Tinh Sạch Enzyme Bromelain Từ Thân Dứa (Ananas Comosus (L.) Merr.) Bằng Phương Pháp Sắc Ký Trao Đổi Ion

Tác giả: NGUYỄN THANH ĐIỀN

Lĩnh vực: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc tinh sạch enzyme bromelain từ thân dứa (Ananas comosus (L.) Merr.) bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion. Bromelain, một loại enzyme cystein proteinase, có nhiều ứng dụng trong công nghiệp và y dược nhờ các hoạt tính peptidase, amidase và esterase. Việc sản xuất sản phẩm bromelain tinh sạch dưới dạng bột là yêu cầu cấp thiết để thuận tiện cho sử dụng, vận chuyển và tồn trữ. Đề tài đã xây dựng quy trình ban đầu để thu nhận bromelain tinh khiết dưới dạng bột thông qua các bước tủa bằng acetone và tinh sạch bằng sắc ký trao đổi ion. Kết quả cho thấy, từ 97 gam thân dứa, sau các bước xử lý, đã thu được 4,6 gam bột bromelain tinh khiết với hàm lượng và hoạt tính enzyme được bảo toàn sau 4 tuần bảo quản ở -20°C. Phương pháp điện di SDS-PAGE xác nhận độ tinh sạch cao của sản phẩm.

Mục lục chi tiết:

• Lời cảm ơn
• Tóm tắt
• Summary
• Mục lục
• Danh sách các bảng
• Danh sách các hình và sơ đồ
• Phần 1. Mở đầu
  • 1.1. Đặt vấn đề
  • 1.2. Mục tiêu của đề tài
  • 1.3. Mục đích
  • 1.4. Giới hạn của đề tài
  • 1.5. Nội dung thực hiện
• Phần 2. Tổng quan tài liệu
  • 2.1. Giới thiệu sơ lược về cây dứa
  • 2.2. Giới thiệu về enzyme
    • 2.2.1. Sơ lược về enzyme
      • 2.2.1.1. Định nghĩa về enzyme
      • 2.2.1.2. Phân loại enzyme
      • 2.2.1.3. Sự khác nhau về chất lượng enzyme và thị trường enzyme công nghiệp
    • 2.2.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến vận tốc phản ứng enzyme.
      • 2.2.2.1. Ảnh hưởng của nồng độ enzyme
      • 2.2.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ cơ chất
      • 2.2.2.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ
  • 2.3. Enzyme Protease
  • 2.4. Enzyme bromelain thu nhận từ dứa
    • 2.4.1. Giới thiệu Enzyme bromelain
    • 2.4.2. Tính chất vật lí
    • 2.4.3. Tính chất hóa học
    • 2.4.4. Hoạt tính của bromelain
    • 2.4.5. Ứng dụng của bromelain
    • 2.4.6. Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước về enzyme Protease (chủ yếu là enzyme bromelain).
  • 2.5. Các kỹ thuật cơ bản trong quá trình tinh sạch protein/enzyme
  • 2.6. Tinh sạch protein
  • 2.7. Giới thiệu phương pháp sắc ký sinh Học
• Phần 3. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
  • 3.1. Thời gian và địa điểm tiến hành
  • 3.2. Vật liệu
  • 3.3. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• Phần 4. Kết quả và thảo luận
  • 4.1. Khảo sát các tác nhân tủa
  • 4.2. Kết quả tinh sạch enzyme bromelain bằng hệ thống tinh sạch BioLogic DuoFlow.
  • 4.3. Đông khô sản phẩm.
  • 4.4. Kết quả điện di xác định trọng lượng phân tử và độ tinh sạch.
• Phần 5. Kết luận và đề nghị
  • 5.1. Kết luận
  • 5.2. Đề nghị
• Phần 6. Tài liệu tham khảo