Tách dòng và biểu hiện gen mã hóa polymerase của virus viêm gan B trên bề mặt tế bào Saccharomyces cerevisiae

Tác giả: Nguyễn Thị Phương Trang, Kim Young-Ho, Đinh Duy Kháng, Đồng Văn Quyền

Lĩnh vực: Tạp chí Công nghệ Sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc biểu hiện gen mã hóa polymerase (pol) của virus viêm gan B (HBV) trên bề mặt nấm men Saccharomyces cerevisiae. Polymerase của HBV đóng vai trò quan trọng trong chu kỳ sống của virus, nhưng việc nghiên cứu các đặc tính sinh hóa của nó gặp khó khăn do không thu nhận đủ lượng protein hòa tan có hoạt tính. Đề tài đã thực hiện khuếch đại gen pol bằng PCR, tách dòng vào vector pGEM-Teasy, sau đó chuyển sang vector biểu hiện pYDI và biến nạp vào S. cerevisiae. Kết quả cho thấy polymerase tái tổ hợp được biểu hiện trên bề mặt tế bào nấm men, liên kết qua cầu nối disulfide, và mức độ biểu hiện tăng dần theo thời gian, đạt cao nhất sau 60 giờ cảm ứng. Nghiên cứu này mở ra hướng đi quan trọng cho việc phân tích cấu trúc, chức năng của HBV polymerase và phát triển thuốc điều trị mới.

Mục lục chi tiết:

• TÓM TẮT
• MỞ ĐẦU
• VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
• Vật liệu
• Phương pháp
• Tách dòng gen mã hóa polymerase
• Xác định trình tự gen pol
• Thiết kế vector biểu hiện gen pol trong S. cerevisiae
• Biểu hiện protein trong S. cerevisiae
• KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• Tách dòng và xác định trình tự gen mã hóa polymerase
• Thiết kế vector pYD1 tái tổ hợp mang gen mã hóa protein Pol
• Biểu hiện protein trong S. cerevisiae
• KẾT LUẬN
• Lời cảm ơn
• TÀI LIỆU THAM KHẢO