Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 7 trang
Dung lượng: 173 KB

Giới thiệu nội dung

Disruption of the Interaction Between the Rieske Iron-Sulfur Protein and Cytochrome b in the Yeast bc₁ Complex Owing to a Human Disease-Associated Mutation Within Cytochrome b

Tác giả: Nicholas Fisher, Ingrid Bourges, Philip Hill, Gael Brasseur, Brigitte Meunier

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Di truyền học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích ảnh hưởng của đột biến G167E trên protein cytochrome b của phức hệ men bc₁. Đột biến này, được phát hiện ở bệnh nhân mắc bệnh cơ tim, đã được đưa vào cytochrome b của nấm men để đánh giá tác động lên cấu trúc và chức năng của phức hệ. Kết quả cho thấy đột biến G167E gây suy giảm nghiêm trọng chức năng hô hấp, làm giảm hoạt tính của phức hệ bc₁ xuống chỉ còn vài phần trăm so với loại hoang dã. Phân tích hoạt tính enzyme chỉ ra rằng đột biến ảnh hưởng đến sự ổn định của phức hệ, có thể do sự gắn kết protein-protein giữa protein sắt-lưu huỳnh (ISP) và cytochrome b bị thay đổi. Mặc dù đột biến không ảnh hưởng đáng kể đến tương tác giữa đầu ISP và vị trí oxy hóa quinol, nó làm chậm đáng kể tốc độ khử cytochrome c₁. Điều này gợi ý rằng đột biến G167E có thể cản trở sự di chuyển của protein sắt-lưu huỳnh, có thể bằng cách làm biến dạng vùng bản lề. Nghiên cứu cũng xác định được các đột biến bù trừ thứ cấp đã giúp phục hồi một phần chức năng của phức hệ.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và hóa chất
  • Chuẩn bị decylubiquinol
  • Tạo chủng đột biến
  • Chuẩn bị màng ty thể và đo hoạt tính khử cytochrome c
  • Động học khử trạng thái tiền ổn định của cytochrome b và c₁
  • Phân tích cộng hưởng thuận từ điện tử (EPR)
  • Kết quả và thảo luận
  • Ảnh hưởng của đột biến G167E lên sự lắp ráp và chức năng của phức hệ bc₁
  • Động học khử trạng thái tiền ổn định của cytochrome b và c₁
  • Sự chiếm dụng vị trí Qo, được kiểm tra bằng phổ EPR
  • Sự dịch chuyển của protein sắt-lưu huỳnh có thể làm biến dạng vùng bản lề và cản trở sự di chuyển của đầu
  • Phân tích các đột biến đảo ngược
  • Tương tác protein-protein giữa vùng bản lề của ISP và helix cd2 ngoại màng của cytochrome b
  • Tài liệu tham khảo