Báo cáo khoa học: Quantitative interdependence of coeffectors, CcpA and cre in carbon catabolite regulation of Bacillus subtilis

Quantitative Interdependence of Coeffectors, CcpA, and Cre in Carbon Catabolite Regulation of Bacillus subtilis

Tác giả: Gerald Seidel, Marco Diel, Norbert Fuchsbauer and Wolfgang Hillen

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối quan hệ tương tác định lượng giữa các yếu tố đồng tác động, CcpA, HPrSerP và CrhP, trong cơ chế điều hòa chuyển hóa carbon ở vi khuẩn Bacillus subtilis. Sử dụng phương pháp cộng hưởng plasmon bề mặt (SPR) và quang phổ huỳnh quang, các nhà khoa học đã phân tích chi tiết sự gắn kết của các protein này với các yếu tố phản ứng chuyển hóa (cre). Kết quả cho thấy HPrSerP và CrhP là những yếu tố chính ảnh hưởng đến sự điều hòa bởi CcpA, với các hằng số cân bằng tương đối nhỏ. Đặc biệt, sự hiện diện của fructose-1,6-bisphosphate (FBP) hoặc glucose-6-phosphate (Glc6-P) làm tăng đáng kể ái lực của HPrSerP đối với CcpA, trong khi không ảnh hưởng đến sự gắn kết của CrhP. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ vai trò riêng biệt của FBP và Glc6-P trong việc tăng cường sự điều hòa gián tiếp qua HPrSerP, nhấn mạnh sự phức tạp và đặc hiệu của cơ chế điều hòa chuyển hóa carbon ở Bacillus subtilis.

Mục lục chi tiết:

• Quantitative interdependence of coeffectors, CcpA, and cre in carbon catabolite regulation of Bacillus subtilis
• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• HPrSerP and CrhP binding to CcpA
• Effects of FBP and Glc6-P on HPrSerP- and CrhP-CcpA interaction
• Stimulation of CcpA-cre complex formation by HPrSerP, CrhP, FBP and Glc6-P
• Association and dissociation kinetics of the CcpA-HPrSerP-xylAcre complex
• Discussion
• Experimental procedures
• Plasmid construction and bacterial strains
• β-Galactosidase assays
• Preparation of proteins
• Preparation of cre DNA
• SPR measurements
• Fluorescence measurements
• Acknowledgements
• References
• Supplementary material