Báo cáo khoa học: Characterization of mucin-type core-1 b1-3 galactosyltransferase homologous enzymes in Drosophila melanogaster

Characterization Of Mucin-Type Core-1 β1-3 Galactosyltransferase Homologous Enzymes In Drosophila Melanogaster

Tác giả: Reto Müller, Andreas J Hülsmeier, Friedrich Altmann, Kelly Ten Hagen, Michael Tiemeyer and Thierry Hennet

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và mô tả các enzyme thuộc nhóm core-1 β1-3 galactosyltransferase (core-1 β3GalT) ở ruồi giấm Drosophila melanogaster. Các enzyme này đóng vai trò quan trọng trong quá trình O-glycosylation, một sửa đổi phổ biến trên protein của sinh vật nhân chuẩn, đặc biệt là trong việc hình thành cấu trúc kháng nguyên T hoặc cấu trúc lõi-1. Nghiên cứu đã xác định bốn đoạn cDNA mã hóa các protein tương tự với enzyme core-1 β3GalT ở người, đã được biểu hiện dưới dạng protein gắn cờ FLAG trong tế bào côn trùng Sf9. Hoạt tính của các enzyme D. melanogaster này đối với hoạt động core-1 β3GalT đã được xác nhận bằng cách sử dụng các chất nhận O-glycopeptide từ mucin MUC5AC. Bên cạnh hoạt tính đối với chất nhận O-glycoprotein, một thành viên trong nhóm enzyme này còn thể hiện hoạt tính mạnh mẽ đối với các chất nhận glycolipid, tạo ra cấu trúc glycolipid Nz6 có đầu cuối lõi-1. Sự hiện diện của nhiều gen core-1 β3GalT ở D. melanogaster cho thấy khả năng biểu hiện O-glycan lõi-1 phức tạp hơn, có thể liên quan đến các chức năng phát triển và sinh lý đa dạng của lớp glycan này.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Figure 1. Alignment of core-1 β3GalT candidate proteins.
• Table 1. Monosaccharide acceptor specificity of D. melanogaster core-1 β3GalT homologs.
• Figure 2. Linkage analysis of the disaccharide Gal-GalNAc.
• Table 2. Specificity of D. melanogaster core-1 β3GalT homologs toward complex type acceptors.
• Figure 3. Extension of glycolipids by CG9520.
• Figure 4. HPLC profiling of glycolipid-derived oligosaccharides.
• Figure 5. Embryonic localization of CG9520 transcripts.
• Discussion
• Figure 6. Salivary gland expression of CG8708 and CG13904-1.
• Experimental procedures
• Cloning of Drosophila cDNAs
• Expression of recombinant proteins
• Table 3. Primers and conditions for molecular cloning of D. melanogaster core-1 β3GalT homologs.
• Glycosyltransferase assays
• HPLC analysis
• In situ hybridization
• Acknowledgements
• References