Báo cáo khoa học: Val216 decides the substrate specificity of a-glucosidase in Saccharomyces cerevisiae

Val216 Decides the Substrate Specificity of α-Glucosidase in Saccharomyces Cerevisiae

Tác giả: Keizo Yamamoto, Akifumi Nakayama, Yuka Yamamoto, Shiro Tabata

Lĩnh vực: Hóa sinh, Khoa học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định vai trò của axit amin Val216 trong việc quyết định đặc hiệu cơ chất của enzyme α-glucosidase ở nấm men Saccharomyces cerevisiae. Các nhà nghiên cứu đã nhân bản, biểu hiện và phân tích hai enzyme α-glucosidase, maltase và isomaltase, từ Saccharomyces cerevisiae. Bằng cách xây dựng các enzyme lai và thực hiện đột biến điểm, họ đã phát hiện ra rằng Val216 là một dư lượng quan trọng trong việc phân biệt các liên kết α-1,4- và α-1,6-glucosidic. Sự thay đổi Val216 thành Thr, tương tự như trong maltase, đã làm thay đổi đặc hiệu cơ chất của isomaltase, cho phép nó thủy phân cả maltose và isomaltose.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Vật liệu và phương pháp
• Nhân bản gen isomaltase từ S. cerevisiae
• Chuyển gen vào vector biểu hiện pKP1500
• Nhân bản gen maltase từ S. cerevisiae
• Biểu hiện enzyme tái tổ hợp trong E. coli và tinh sạch enzyme
• Xây dựng enzyme lai từ maltase và isomaltase tái tổ hợp
• Đột biến điểm
• Kết quả và Thảo luận
• Nhân bản enzyme α-glucosidase ở nấm men
• Đánh giá enzyme tái tổ hợp so với enzyme tự nhiên
• Đặc hiệu cơ chất của enzyme lai
• Tài liệu tham khảo