Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 6 trang
Dung lượng: 133 KB

Giới thiệu nội dung

Unfolding And Refolding Studies Of Frutalin, A Tetrameric D-galactose Binding Lectin

Tác giả: Patricia T. Campana, Derminda I. Moraes, Ana C. O. Monteiro-Moreira, Leila M. Beltramini

Lĩnh vực: Biophysics and Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào quá trình gấp lại (refolding) của frutalin, một lectin có cấu trúc tetrameric, có khả năng liên kết với D-galactose và có hoạt tính sinh học đáng kể. Các thí nghiệm về biến tính nhiệt và biến tính bằng guanidine hydrochloride cho thấy frutalin có thể gấp lại dưới cả hai điều kiện. Phân tích đường cong biến tính bằng phát xạ huỳnh quang cho thấy độ bền vững cấu trúc của frutalin là 17.12 kJ·mol⁻¹ khi có D-galactose và 12.34 kJ·mol⁻¹ khi không có D-galactose. Các dạng frutalin ban đầu, đã biến tính, đã gấp lại và dạng gấp lại sai (misfolded) đã được phân tách bằng sắc ký loại trừ kích thước (SEC). Phân tích cấu trúc thứ cấp bằng phổ CD cho thấy cấu trúc của frutalin đã gấp lại gần giống với cấu trúc ban đầu. Các kết quả này củng cố cho giả thuyết về cơ chế “hạt nhân hóa-ngưng tụ” (nucleation-condensation), trong đó vị trí liên kết đường đóng vai trò như một hạt nhân để khởi đầu quá trình gấp lại ở cấp độ đơn phân, sau đó các đơn phân này tự lắp ráp thành thể tứ phân. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng frutalin có độ bền vững cao hơn khi có sự hiện diện của đường.

Mục lục chi tiết:

  • Unfolding and refolding studies of frutalin, a tetrameric D-galactose binding lectin
  • Abstract
  • Keywords
  • Correspondence
  • Abbreviations
  • Publisher’s note
  • Introduction
  • Materials and Methods
  • Frutalin purification and heamagglutination activity
  • Frutalin denaturation and refolding
  • Circular dichroism (CD) measurements
  • Fluorescence measurements
  • Size exclusion chromatography (SEC)
  • Analysis of equilibrium unfolding
  • Results and Discussion
  • Table 1. Conformational stability of frutalin.
  • Figure 1. GndHCl-induced equilibrium curves for the unfolding of frutalin.
  • Figure 2. SEC for dilution method.
  • Figure 3. Frutalin CD spectra.
  • Figure 4. Frutalin emission fluorescence spectra.
  • Table 2. Heamagglutination activity.
  • Acknowledgements
  • References