ThermoFAD, A Thermofluor®-adapted flavin ad hoc detection system for protein folding and ligand binding

ThermoFAD, A Thermofluor®-adapted Flavin Ad Hoc Detection System For Protein Folding And Ligand Binding

Tác giả: Federico Forneris, Roberto Orru, Daniele Bonivento, Laurent R. Chiarelli and Andrea Mattevi

Lĩnh vực: Department of Genetics and Microbiology, University of Pavia, Italy

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này giới thiệu một phương pháp mới có tên là ThermoFAD (Thermofluor®-adapted flavin ad hoc detection system), là sự cải tiến của kỹ thuật Thermofluor®. Phương pháp này sử dụng huỳnh quang nội tại của cofactor flavin có trong protein làm đầu dò để theo dõi sự gấp nếp và độ bền vững của protein. Kỹ thuật này cho phép thu thập lượng lớn dữ liệu sinh hóa chỉ với lượng mẫu protein nhỏ và thiết bị phòng thí nghiệm tiêu chuẩn. ThermoFAD có khả năng đơn giản hóa việc xác định các điều kiện tinh sạch và bảo quản tối ưu, cũng như các phối tử có ái lực cao. Ưu điểm nổi bật của phương pháp là khả năng ứng dụng cho các flavoprotein có đặc điểm khác nhau, bao gồm cả các protein gắn màng, và có thể được sử dụng ngay cả khi có sự hiện diện của các hợp chất có thể gây nhiễu cho thuốc nhuộm huỳnh quang trong phương pháp Thermofluor® truyền thống, chẳng hạn như chất tẩy rửa.

Mục lục chi tiết: