Báo cáo Y học: The import of ferredoxin–NADP+ reductase precursor into chloroplasts is modulated by the region between the transit peptide and the mature core of the protein

The Import Of Ferredoxin–NADP+ Reductase Precursor Into Chloroplasts Is Modulated By The Region Between The Transit Peptide And The Mature Core Of The Protein

Tác giả: Daniela V. Rial, Verónica A. Lombardo, Eduardo A. Ceccarelli and Jorgelina Ottado

Lĩnh vực: Molecular Biology Division, IBR (Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario), CONICET, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Argentina.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào quá trình vận chuyển tiền chất protein ferredoxin–NADP+ reductase (preFNR) vào lục lạp. Các nhà khoa học đã phân tích ảnh hưởng của các vùng khác nhau trong chuỗi tiền chất, đặc biệt là vùng nối giữa peptide đích và lõi protein trưởng thành, đến tốc độ nhập bào. Kết quả cho thấy rằng khoảng cách giữa peptide đích và lõi protein trưởng thành quyết định động học nhập bào, với các tiền chất có khoảng cách dài hơn được nhập bào nhanh hơn. Tương tự, các tiền chất bị biến đổi ở vùng N-terminal của protein trưởng thành cũng cho thấy tốc độ nhập bào tăng lên. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng vùng N-terminal của protein trưởng thành, đặc trưng bởi các điện tích âm, có thể ảnh hưởng đến tốc độ nhập bào mà không làm thay đổi độ ổn định cấu trúc tổng thể của tiền chất.

Mục lục chi tiết:

• Experimental Procedures
• Plasmid constructions, expression and purification of preFNRs
• Import into chloroplasts
• Urea gradient gel electrophoresis
• Results
• Comparison of FNR amino acid terminal sequences
• Expression and purification of the wild-type and mutant ferredoxin-NADP+ reductase precursors
• Import kinetics of folded precursors
• Import kinetics of unfolded precursors
• Discussion
• Acknowledgments
• References