Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 577 KB

Giới thiệu nội dung

The F13 residue is critical for interaction among the coat protein subunits of papaya mosaic virus

Tác giả: M. E. Laliberté Gagné, K. Lecours, S. Gagné, D. Leclerc

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Virus học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của axit amin F13 trong quá trình tự lắp ráp của protein vỏ (CP) từ virus khảm đu đủ (PapMV) thành các hạt giống nucleocapsid (NLPs). Thông qua phân tích đột biến và xóa bỏ, các nhà nghiên cứu đã xác định rằng F13 là yếu tố quan trọng cho sự tương tác và lắp ráp của các tiểu đơn vị CP. Việc thay thế F13 bằng các axit amin kỵ nước khác (L hoặc Y) vẫn cho phép tự lắp ráp thành NLPs, trong khi các thay thế bằng các axit amin không kỵ nước hoặc tích điện lại cản trở quá trình này. Kết quả cho thấy tương tác kỵ nước ở đầu N-terminus là cần thiết cho quá trình tự lắp ráp của protein thành NLPs. Nghiên cứu cũng thảo luận về tầm quan trọng của F13 đối với sự lắp ráp của các thành viên khác trong họ potexvirus.

Mục lục chi tiết:

  • Tóm tắt
  • Từ khóa
  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Biểu hiện và tinh chế các dạng cắt cụt và đột biến của PapMV CP
  • Đặc trưng của NLPs tái tổ hợp
  • Phân tích sắc ký lọc gel của các protein tái tổ hợp bị cắt cụt và đột biến
  • Phân tích phổ NMR ¹H-¹⁵N
  • Phân tích dịch chuyển điện di (Gel shift assays)
  • Đo hàm lượng RNA bằng quang phổ
  • Thảo luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Nhân bản và biểu hiện protein tái tổ hợp
  • Biểu hiện và tinh chế protein tái tổ hợp từ E. coli
  • Tách đĩa và NLP
  • SDS/PAGE và điện di blot
  • Kính hiển vi điện tử
  • Phân hủy bằng axit axetic
  • Lọc gel
  • Phổ NMR
  • Ghi âm RNA và EMSA
  • Tài liệu tham khảo
  • Tài liệu bổ sung