Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Substrate Specificity and Excision Kinetics of Natural Polymorphic Variants and Phosphomimetic Mutants of Human 8-Oxoguanine-DNA Glycosylase

Tác giả: Viktoriya S. Sidorenko, Arthur P. Grollman, Pawel Jaruga, Miral Dizdaroglu, Dmitry O. Zharkov

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Di truyền học phân tử, Khoa học Y Sinh học

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào enzyme 8-oxoguanine-DNA glycosylase (OGG1) của con người, một enzyme quan trọng trong việc sửa chữa các tổn thương DNA do oxy hóa. Bài báo khảo sát đặc tính hoạt động và động học cắt bỏ của các biến thể tự nhiên đa hình và các mutant mô phỏng phosphoryl hóa của enzyme này. Cụ thể, nghiên cứu đánh giá khả năng loại bỏ các tổn thương như 8-oxo-7,8-dihydroguanine (8-oxoGua) và 2,6-diamino-4-hydroxy-5-formamidopyrimidine khỏi DNA, cũng như sự ảnh hưởng của các biến đổi amino acid đến hoạt tính và đặc tính nhận diện cơ chất của OGG1. Các kết quả cho thấy các biến thể và mutant này có sự khác biệt về động học và đặc hiệu cơ chất so với enzyme dạng hoang dã, đặc biệt là ảnh hưởng đến khả năng phân biệt giữa các cặp bazơ không phù hợp. Ngoài ra, nghiên cứu cũng xem xét sự tương tác của các mutant này với AP endonuclease APEX1, một yếu tố có khả năng kích thích hoạt động của OGG1.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Keywords
  • Correspondence
  • Substrate specificity and excision kinetics of natural polymorphic variants and phosphomimetic mutants of human 8-oxoguanine-DNA glycosylase
  • Results
  • Selection of amino acids for mutagenesis
  • Activity and substrate specificity of OGG1 mutants on oligodeoxynucleotide substrates
  • Activity and substrate specificity of OGG1 mutants on γ-irradiated DNA
  • Stimulation of OGG1 phosphomimetic mutants by AP endonuclease
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Enzymes and oligodeoxynucleotides
  • Construction and purification of OGG1 mutants
  • Kinetics of OGG1 mutants on oligodeoxynucleotide substrates
  • Kinetics of OGG1 mutants on γ-irradiated DNA substrates
  • Stimulation of OGG1 by APEX1
  • Acknowledgements
  • References